Question

【題目】回答下列關(guān)于遺傳信息的表達(dá)和生物工程問(wèn)題：

圖（1）為限制酶EcoRⅠ的識(shí)別序列，圖（2）表示質(zhì)粒，圖（3）表示目的基因及限制酶切點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）圖（1）中限制酶EcoRⅠ的特點(diǎn)是______。

（2）為了使目的基因和質(zhì)粒定向連接并且有利于受體細(xì)胞的篩選，提高重組效率，應(yīng)該選擇的限制酶是______。

（3）如果大腸桿菌是受體細(xì)胞，則其體內(nèi)應(yīng)不含______基因，以利于篩選出含重組質(zhì)粒的受體菌。按此要求，成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌具有的特點(diǎn)是______

A．能在含有青霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)

B．能在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)

C．在含有青霉素的培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)

D．在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)

（4）為了獲得含重組質(zhì)粒的單個(gè)大腸桿菌的菌落，常用的接種方法是______。

（5）若該目的基因合成的是脂肪酶，在生產(chǎn)提純分泌型脂肪酶工程中，加入硫酸銨使酶與其他雜質(zhì)分離，該過(guò)程屬于酶分離提純步驟中的______。

A．過(guò)濾酶

B．干燥酶

C．層析酶

D．沉淀酶

Answer 1

【答案】特異性識(shí)別和切割DNA PstⅠ、EcoRⅠ 抗四環(huán)素 B、C 平板劃線法或稀釋涂布平板法 D

【解析】

1、基因工程又叫DNA重組技術(shù)，是指按照人們的意愿，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過(guò)體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。

2、基因工程的工具：

（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。

（2）DNA連接酶：連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。

（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。

（1）圖（1）中限制酶EcoRⅠ的特點(diǎn)是特異性識(shí)別和切割DNA（特異性識(shí)別GAAATTC和切割DNA中鳥(niǎo)嘌呤脫氧核苷酸和腺嘌呤脫氧核苷酸之間的鍵）。

（2）為了使目的基因和質(zhì)粒定向連接并且有利于受體細(xì)胞的篩選，提高重組效率，又使四環(huán)素抗性基因不被破壞，應(yīng)該選擇的限制酶是 PstⅠ、EcoRⅠ。

（3）如果大腸桿菌是受體細(xì)胞，則其體內(nèi)應(yīng)不含抗四環(huán)素基因，以利于篩選出含重組質(zhì)粒的受體菌。按此要求，成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌具有的特點(diǎn)是能在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)但在含有青霉素的培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)。

（4）為了獲得含重組質(zhì)粒的單個(gè)大腸桿菌的菌落，常用的接種方法是平板劃線法或稀釋涂布平板法。

（5）生產(chǎn)提純分泌型脂肪酶工程中，加入硫酸銨使酶與其他雜質(zhì)分離，該過(guò)程屬于酶分離提純步驟中的沉淀酶