Question

(附加題10分) 基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，便于重組和篩選。已知限制酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G^↓GATCC— ，限制酶II的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—^↓GATC—; Gene I是抗氨芐青霉素基因，Gene II是抗四環(huán)素基因。根據(jù)圖示回答下列問(wèn)題：

（1）用限制酶II切割DNA后得到的是兩個(gè)          末端。限制酶I剪切得到的一個(gè)末端可以畫為                            。

（2）本實(shí)驗(yàn)中若要得到符合要求的重組質(zhì)粒，應(yīng)該用       切割質(zhì)粒，用       切割目的基因。然后用              處理混合物得到重組質(zhì)粒。

（3）把重組質(zhì)粒導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞的方法一般是              。要把成功導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞篩選出來(lái)，應(yīng)該將細(xì)胞放在含有              的培養(yǎng)基中選擇培養(yǎng)。

（4）不同生物的基因可以拼接的原因是                            。

 

Answer 1

【答案】

（1）黏性末端  

（2）限制酶I            限制酶II    DNA連接酶

（3）顯微注射法                     氨芐青霉素

（4）它們的DNA都是由4種脫氧核糖核苷酸構(gòu)成的雙螺旋結(jié)構(gòu)（有相似的DNA結(jié)構(gòu)）

【解析】（1）根據(jù)限制酶II的識(shí)別序列，切割DNA后能夠得到2個(gè)黏性末端。

（2）限制酶II能夠識(shí)別限制酶I的識(shí)別序列，所以切割質(zhì)粒選擇限制酶I，切割目的基因選擇限制酶II。構(gòu)建重組質(zhì)粒需要DNA連接酶處理。

（3）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞的方法一般是顯微注射法，質(zhì)粒中標(biāo)記基因是氨芐青霉素基因，可用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基來(lái)選擇導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞。

（4）由于不同生物的DNA都是由4種脫氧核糖核苷酸構(gòu)成的雙螺旋結(jié)構(gòu)，所以不同生物的基因可以拼接。