Question

［生物—選修3現(xiàn)代生物科技專題

人的內(nèi)皮抑素（一種蛋白質(zhì)）能誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，進(jìn)而抑制新血管的產(chǎn)生。臨床上通過(guò)靜脈注射含有內(nèi)皮抑素基因的腺病毒感染腫瘤細(xì)胞，使腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生并釋放內(nèi)皮抑素，抑制新生血管的形成，使腫瘤細(xì)胞進(jìn)人休眠狀態(tài)并誘導(dǎo)其凋亡�；卮鹣铝袉�(wèn)題：

（1）從肝細(xì)胞中提取總mRNA,利用逆轉(zhuǎn)錄酶合成 ，根據(jù)內(nèi)皮抑素基因的 設(shè)計(jì)并合成引物，利用PCR技術(shù)得到大量?jī)?nèi)皮抑素基因。

（2）在構(gòu)建含內(nèi)皮抑素基因的腺病毒并導(dǎo)人受體細(xì)胞的過(guò)程中，以 作為工具酶，以 作為載體。

（3）在進(jìn)入臨床使用前，需用體外培養(yǎng)的血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行生理、病理檢測(cè)。為獲得大量的血管內(nèi)皮細(xì)胞，首先用 酶處理血管內(nèi)皮組織，使其分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液，然后將其放人含 等一些天然成分的合成培養(yǎng)基中培養(yǎng)。

（4）血管內(nèi)皮細(xì)胞被重組腺病毒感染后，若通過(guò) 方法檢測(cè)呈陽(yáng)性并觀察到細(xì)胞凋亡，則說(shuō)明內(nèi)皮抑素基因得到表達(dá)且具有生物學(xué)活性。

（5）臨床上將含內(nèi)皮抑素基因的腺病毒通過(guò)靜脈注射感染腫瘤細(xì)胞，使腫瘤生長(zhǎng)受到抑制，這種治療方法屬于 （填“體內(nèi)”或“體外”）基因治療。

Answer 1