提取分離DNA時(shí),加入洗滌劑的目的是
A.破壞細(xì)胞質(zhì) B.瓦解細(xì)胞膜 C.溶解DNA D.溶解蛋白質(zhì)
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
下列與實(shí)驗(yàn)有關(guān)的敘述不正確的是 ( )
A.蛋白質(zhì)鑒定時(shí),向豆?jié){中先加入氫氧化鈉溶液,再滴入硫酸銅溶液,并水浴加熱
B.用雞血細(xì)胞提取DNA時(shí),先去除血漿再加蒸餾水,有利于細(xì)胞快速破裂
C.用適宜濃度的硝酸鉀溶液處理成熟的植物細(xì)胞可觀察質(zhì)壁分離和自動(dòng)復(fù)原現(xiàn)象
D.提取綠葉中的色素時(shí),葉片的研磨應(yīng)迅速充分
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科目:高中生物 來(lái)源:2012-2013學(xué)年江蘇鹽城阜寧縣陳集中學(xué)高二下學(xué)期期末考試生物試卷(帶解析) 題型:單選題
下列與實(shí)驗(yàn)有關(guān)的敘述不正確的是 ( )
A.蛋白質(zhì)鑒定時(shí),向豆?jié){中先加入氫氧化鈉溶液,再滴入硫酸銅溶液,并水浴加熱 |
B.用雞血細(xì)胞提取DNA時(shí),先去除血漿再加蒸餾水,有利于細(xì)胞快速破裂 |
C.用適宜濃度的硝酸鉀溶液處理成熟的植物細(xì)胞可觀察質(zhì)壁分離和自動(dòng)復(fù)原現(xiàn)象 |
D.提取綠葉中的色素時(shí),葉片的研磨應(yīng)迅速充分 |
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科目:高中生物 來(lái)源:2011-2012學(xué)年安徽宿松復(fù)興中學(xué)高二下學(xué)期第三次月考生物試卷(帶解析) 題型:綜合題
(10分)圓褐固氮菌是自生固氮菌,為經(jīng)濟(jì)有效地提高農(nóng)作物產(chǎn)量,人們一直在努力研究、尋找固氮基因。對(duì)基因的研究常常因研究樣品中DNA含量太低而難以進(jìn)行,PCR技術(shù)有效地解決了這個(gè)問(wèn)題。如今對(duì)基因的深入研究使人類跨入了蛋白組研究時(shí)代,從復(fù)雜的細(xì)胞混合物中提取、分離高純度的蛋白質(zhì)是該研究要做的基本工作之一。
(1)某同學(xué)在做微生物實(shí)驗(yàn)時(shí),不小心把圓褐固氮菌樣品和酵母菌樣品混在一起,已知青霉素會(huì)影響固氮菌的生長(zhǎng)繁殖,但不影響真菌的生長(zhǎng)繁殖。請(qǐng)?zhí)羁胀瓿煞蛛x這兩種菌的主要實(shí)驗(yàn)步驟:
①分別配置 的培養(yǎng)基和 的培養(yǎng)基,分別分成兩份,依次標(biāo)上A、a、B、b備用;
②分別向A、B培養(yǎng)基接種 ;
③把接種后的培養(yǎng)基放在恒溫箱中3d—4d;
④從A、B培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的 中挑取生長(zhǎng)良好的菌株,分別接種到 中;
⑤ 。
(2)用基因工程技術(shù)從經(jīng)過(guò)分離、提純的圓褐固氮菌中獲取固氮基因,然后進(jìn)行PCR擴(kuò)增。下列表1和表2分別表示用PCR擴(kuò)增固氮基因的反應(yīng)體系及反應(yīng)條件。
反應(yīng)條件 | ||
| 溫度 | 時(shí)間 |
變 性 | 95℃ | 30s |
復(fù) 性 | 55℃ | 30s |
延 伸 | 72℃ | 1min |
30個(gè)循環(huán)后 | 適宜 | 5-10min |
保 溫 | 4℃ | 2h |
PCR反應(yīng)體系 | 50ul |
緩沖液 | 5ul |
脫氧核苷酸 | 1ul |
引物A | 0.5ul |
引物B | 0.5ul |
DNA聚合酶 | 0.5U |
模板DNA | 1-2ul |
加去離子水補(bǔ)足至50 ul |
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科目:高中生物 來(lái)源:2013-2014學(xué)年福建福州八中高三第六次質(zhì)檢考試生物卷(解析版) 題型:綜合題
白細(xì)胞介素是一類淋巴因子。研究人員將白細(xì)胞介素的基因?qū)氲浇湍讣?xì)胞中,使其分泌出有活性的人白細(xì)胞介素。
(1)目的基因獲取和擴(kuò)增:
①從健康人體外周靜脈血分離得到淋巴細(xì)胞,于37℃培養(yǎng)48h,提取細(xì)胞總RNA,經(jīng)???????????? 作用生成cDNA。
②根據(jù)已知目的基因的核苷酸序列,合成引物、通過(guò)PCR擴(kuò)增獲取目的基因,此時(shí)需要加入的反應(yīng)物與生成cDNA時(shí)所加反應(yīng)物不同的是????? (至少寫出兩種)。
(2)重組載體的構(gòu)建:由圖中可知:酶切載體和目的基因用的是___________酶,經(jīng)DNA連接酶處理,形成重組載體。重組載體的化學(xué)本質(zhì)是????????????
(3)將重組載體導(dǎo)入酵母細(xì)胞,在培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時(shí)間后,利用純化的產(chǎn)物進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),可研究人的白細(xì)胞介素對(duì)于???????????? 的作用。
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科目:高中生物 來(lái)源:2013屆安徽宿松復(fù)興中學(xué)高二下學(xué)期第三次月考生物試卷(解析版) 題型:綜合題
(10分)圓褐固氮菌是自生固氮菌,為經(jīng)濟(jì)有效地提高農(nóng)作物產(chǎn)量,人們一直在努力研究、尋找固氮基因。對(duì)基因的研究常常因研究樣品中DNA含量太低而難以進(jìn)行,PCR技術(shù)有效地解決了這個(gè)問(wèn)題。如今對(duì)基因的深入研究使人類跨入了蛋白組研究時(shí)代,從復(fù)雜的細(xì)胞混合物中提取、分離高純度的蛋白質(zhì)是該研究要做的基本工作之一。
(1)某同學(xué)在做微生物實(shí)驗(yàn)時(shí),不小心把圓褐固氮菌樣品和酵母菌樣品混在一起,已知青霉素會(huì)影響固氮菌的生長(zhǎng)繁殖,但不影響真菌的生長(zhǎng)繁殖。請(qǐng)?zhí)羁胀瓿煞蛛x這兩種菌的主要實(shí)驗(yàn)步驟:
①分別配置 的培養(yǎng)基和 的培養(yǎng)基,分別分成兩份,依次標(biāo)上A、a、B、b備用;
②分別向A、B培養(yǎng)基接種 ;
③把接種后的培養(yǎng)基放在恒溫箱中3d—4d;
④從A、B培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的 中挑取生長(zhǎng)良好的菌株,分別接種到 中;
⑤ 。
(2)用基因工程技術(shù)從經(jīng)過(guò)分離、提純的圓褐固氮菌中獲取固氮基因,然后進(jìn)行PCR擴(kuò)增。下列表1和表2分別表示用PCR擴(kuò)增固氮基因的反應(yīng)體系及反應(yīng)條件。
反應(yīng)條件 |
||
|
溫度 |
時(shí)間 |
變 性 |
95℃ |
30s |
復(fù) 性 |
55℃ |
30s |
延 伸 |
72℃ |
1min |
30個(gè)循環(huán)后 |
適宜 |
5-10min |
保 溫 |
4℃ |
2h |
PCR反應(yīng)體系 |
50ul |
緩沖液 |
5ul |
脫氧核苷酸 |
1ul |
引物A |
0.5ul |
引物B |
0.5ul |
DNA聚合酶 |
0.5U |
模板DNA |
1-2ul |
加去離子水補(bǔ)足至50 ul |
①?gòu)纳媳碇锌傻贸觯琍CR技術(shù)與DNA復(fù)制相比較,主要區(qū)別之一是 。
此外,從反應(yīng)條件看,所使用的DNA聚合酶應(yīng)具有__________的特點(diǎn)。每次循環(huán)都需要2種引物的主要原因是_______________ ________________。
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