Question

某興趣小組對受污染的河流水體進(jìn)行了大腸桿菌數(shù)目的測定。請回答問題：

（1）測定大腸桿菌活菌數(shù)目時，需制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中為細(xì)菌提供氮源的物質(zhì)是______________。培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右才能用來倒平板，你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？_____________。等待平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置的原因是____________________。為了鑒別大腸桿菌菌落，可向培養(yǎng)基中加入伊紅美藍(lán)作為指示劑，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)__________。

（2）為了便于統(tǒng)計污染嚴(yán)重的水體中活菌的數(shù)目，需將水樣進(jìn)行適當(dāng)稀釋，例如取水樣2mL，加入無菌水________mL制備稀釋倍數(shù)為101的稀釋液，并照此依次制備更高倍數(shù)的稀釋液。每個稀釋倍數(shù)的菌液取10mL進(jìn)行過濾，然后將濾膜放置在培養(yǎng)基上。為了防止雜菌污染，稀釋、過濾和旋轉(zhuǎn)濾膜等操作都應(yīng)該在__________進(jìn)行。

（3）將放有濾膜的平板置于適宜條件下培養(yǎng)，每隔12h統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，應(yīng)選取菌落數(shù)目____________時的記錄作為結(jié)果。如果經(jīng)過培養(yǎng)后稀釋倍數(shù)為102的4個平板上菌落數(shù)分別為43、47、42、48，那么每升河水中約含大腸桿菌_______個。用這種方法測定的菌落數(shù)量往往比實際活菌數(shù)量更_______，這是因為_____________。

（4）除了上述活菌計數(shù)法外，顯微鏡直接計數(shù)也是測定細(xì)菌數(shù)量的常用方法。利用血細(xì)胞計數(shù)板（2mm×2mm）、滴管、試管、顯微鏡等儀器進(jìn)行研究，從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計數(shù)之前，應(yīng)將_________________；采用抽樣檢測的方法，先_______________計數(shù)室上，再_______________________，讓培養(yǎng)液自行滲入計數(shù)室（厚度為0.1mm）；需稍等片刻，待____________________時，再將血細(xì)胞計數(shù)板放在顯微鏡下觀察計數(shù)。已知計數(shù)板每小格為0.1mm×0.1mm，經(jīng)隨機檢測，五個小方格內(nèi)細(xì)菌平均數(shù)為8.2個，則細(xì)菌密度_________個/L。

Answer 1