為實(shí)現(xiàn)目的基因與載體結(jié)合，以便在大腸桿菌中大量表達(dá)相應(yīng)的蛋白質(zhì)，研究人員進(jìn)行了如圖所示操作。請分析回答下列問題：

(1)將_____________同時用BamH I切割并混合，加入___________進(jìn)行連接，再與大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞混合，最后，將混合物接種在含有___________平板培養(yǎng)基上。

(2)切割后的載體用堿性磷酸酶處理，除去末端的5’磷酸，可防止載體自我連接，目的基因片段不用堿性磷酸酶處理，仍然能與用堿性磷酸酶處理過的載體連接。在5組平板培養(yǎng)基上接種了不同操作的大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞，如下表所示。

①第1組實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖谴_認(rèn)____________是否符合實(shí)驗(yàn)要求。

②第2組平板培養(yǎng)基菌落數(shù)目最大，說明大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞能夠___________

③第3組實(shí)驗(yàn)用來檢驗(yàn)___________酶是否具有活性。第4組實(shí)驗(yàn)用來檢驗(yàn)___________酶是否具有活性。

④實(shí)驗(yàn)中用堿性磷酸酶處理載體可以降低僅有載體的菌落數(shù)，增加攜帶___________的菌落比例

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來源：江蘇省儀征中學(xué)2010－2011學(xué)年高二上學(xué)期期末統(tǒng)考生物試題（選修） 題型：071

下圖（一）為某基因工程中利用的質(zhì)粒筒圖，小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶EcoRI、BamHI的酶切位點(diǎn)，ampR為青霉素（抗生素）抗性基因，tctR為四環(huán)素（抗生素）抗性基因，P為啟動因子，T為終止子，ori為復(fù)制原點(diǎn)。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內(nèi)的多種酶的酶切位點(diǎn)。下圖（二）為幾種酶作用于基因的位置。請回答下列問題：

（1）在基因工程中常用的工具有三種：一是用作切取目的基因的________酶；二是將目的基因與運(yùn)載體拼接的________酶；三是作為運(yùn)載體的質(zhì)粒。

（2）將含有目的基因的DNA與經(jīng)特定的酶切后的動載體（質(zhì)粒）進(jìn)行拼接形成重組DNA，理論上講，重組DNA可能有________種，其中有效的（所需要的）重組DNA是________，因此需要對這些拼接產(chǎn)物進(jìn)行分離提純。

（3）利用圖（一）所示的質(zhì)粒拼接形成的拼接產(chǎn)物（重組DNA）與無任何抗藥性的原核宿主細(xì)胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細(xì)胞所含有的拼接產(chǎn)物（重組DNA）是________。

（4）有效的重組DNA成功導(dǎo)入受體細(xì)胞進(jìn)行表達(dá)時，首先需要進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點(diǎn)是圖（一）中的________。

（5）在基因工程中，作用于圖（二）所示b位置的酶是________。

（6）綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的形成是通過基因工程實(shí)現(xiàn)的，它是將水母綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)移到豬的特定細(xì)胞中，操作過程中一般利用未受精的卵細(xì)胞去核后做為受體，而不用普通的體細(xì)胞，原因是：________________。

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科目：高中生物 來源：2013屆吉林省高二下學(xué)期第一次月考生物試卷（解析版） 題型：綜合題

（14分）據(jù)調(diào)查，隨著化學(xué)農(nóng)藥的產(chǎn)量和品種逐年增多，害蟲的抗藥性也不斷增強(qiáng)，造成的危害很嚴(yán)重，如近年來，棉鈴蟲在我國大面積暴發(fā)成災(zāi)，造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。針對這種情況，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)寄生在棉鈴蟲消化道內(nèi)的蘇云金芽孢桿菌能分泌一種毒蛋白，它能使寄主至死而對人畜無害。我國科技工作者已成功地將該毒蛋白基因?qū)朊藁ㄖ仓牦w內(nèi)并實(shí)現(xiàn)表達(dá)。由于棉鈴蟲吃了這種“轉(zhuǎn)基因抗蟲棉”就會死亡，所以該種棉被推廣后，收到了很好的經(jīng)濟(jì)效益。

    請據(jù)以上材料，回答下列問題：

⑴害蟲抗藥性的增強(qiáng)是__________________________的結(jié)果。

⑵抗蟲棉的具體培育過程包括                          、                          、

                             、                             。                               

（3）該項技術(shù)的遺傳學(xué)原理是                                           （    ）

A．基因突變       B．基因重組 Ｃ．基因復(fù)制     Ｄ．基因分離

（4）利用下面技術(shù)可獲得抗蟲基因。如：從蘇云金芽孢桿菌核糖體上分離出            ，

并以此為模板，        成互補(bǔ)的單鏈DNA，然后單鏈DNA在酶的作用下合成                 。

（5）要使抗蟲基因與質(zhì)粒結(jié)合，必須用               來切割基因載體和目的基因，切割后的質(zhì)粒與目的基因片段還需要              酶，根據(jù)              原則使兩者粘合在一起。

（6）抗蟲棉之所以能抗蟲，是因?yàn)槊藁?xì)胞中的抗蟲基因表達(dá)出                              。

（7）該科技成果在環(huán)保上的重要作用是  ___________________________________________。

 

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科目：高中生物 來源：2013屆河南省高二3月月考生物試卷 題型：綜合題

據(jù)調(diào)查，隨著化學(xué)農(nóng)藥的產(chǎn)量和品種逐年增多，害蟲的抗藥性也不斷增強(qiáng)，造成的危害很嚴(yán)重，如近年來，棉鈴蟲在我國大面積暴發(fā)成災(zāi)，造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。針對這種情況，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)寄生在棉鈴蟲消化道內(nèi)的蘇云金芽孢桿菌能分泌一種毒蛋白，它能使寄主至死而對人畜無害。我國科技工作者已成功地將該毒蛋白基因?qū)朊藁ㄖ仓牦w內(nèi)并實(shí)現(xiàn)表達(dá)。由于棉鈴蟲吃了這種“轉(zhuǎn)基因抗蟲棉”就會死亡，所以該種棉被推廣后，收到了很好的經(jīng)濟(jì)效益。

    請據(jù)以上材料，回答下列問題：

⑴害蟲抗藥性的增強(qiáng)是__________________________的結(jié)果。

⑵“轉(zhuǎn)基因”抗蟲棉的培育應(yīng)用了_______________技術(shù)�？瓜x棉的具體培育過程包括

                      、                        、                       、    

                           

（3）該項技術(shù)的遺傳學(xué)原理是                                           （    ）

A．基因突變     B．基因重組 Ｃ．基因復(fù)制   Ｄ．基因分離

（4）利用下面技術(shù)可獲得抗蟲基因。如：從蘇云金芽孢桿菌核糖體上分離出            ，

并以此為模板，        成互補(bǔ)的單鏈DNA，然后單鏈DNA在酶的作用下合成                 。

（5）要使抗蟲基因與質(zhì)粒結(jié)合，必須用               來切割基因載體和目的基因，切割后的質(zhì)粒與目的基因片段還需要              酶，根據(jù)              原則使兩者粘合在一起。

（6）抗蟲棉之所以能抗蟲，是因?yàn)槊藁?xì)胞中的抗蟲基因表達(dá)出                              。

（7）該科技成果在環(huán)保上的重要作用是  ___________________________________________。

 

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科目：高中生物 來源：2010年河南省鄭州市高二下學(xué)期期中考試生物卷 題型：綜合題

科學(xué)家通過基因工程方法，將蘇云金芽孢桿菌的Bt毒蛋白基因轉(zhuǎn)入普通棉株細(xì)胞內(nèi)，并成功實(shí)現(xiàn)了表達(dá)，從而培育出了能抗棉鈴蟲的棉花植株一抗蟲棉。其過程大致如圖所示：

 

（1）Bt毒蛋白基因轉(zhuǎn)入普通棉株細(xì)胞內(nèi)并成功實(shí)現(xiàn)表達(dá)的過程，在基因工程中稱為＿＿＿＿；將目的基因?qū)耸荏w細(xì)胞的方法有很多種，該題中涉及的是＿＿＿＿＿＿＿＿。

（2）目的基因能否在棉株體內(nèi)穩(wěn)定維持和表達(dá)，關(guān)鍵是是否使＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿上，這需要通過檢測才能知道，檢測采用的方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（3）“轉(zhuǎn)基因抗蟲棉” Bt毒蛋白基因表達(dá)過程可表示為＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿；科學(xué)家預(yù)言，此種“轉(zhuǎn)基因抗蟲棉”獨(dú)立種植若干代以后，也將出現(xiàn)不抗蟲的植株，此現(xiàn)象來源于＿＿＿＿＿＿＿＿。

（4）若要把Bt毒蛋白基因?qū)氲酱竽c桿菌中，要先用＿＿＿＿處理細(xì)胞，使細(xì)胞處于＿＿＿＿＿＿（狀態(tài)），然后將重組表達(dá)載體DNA溶于緩沖液中，在一定溫度下與細(xì)胞混合。

 

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