Question

【題目】環(huán)境污染物多聚聯(lián)苯（C12H10-xClx）難以降解，受其污染的土壤中常有重金屬污染同時存在。研究發(fā)現(xiàn)聯(lián)苯降解菌內(nèi)的聯(lián)苯水解酶是催化多聚聯(lián)苯降解的關(guān)鍵酶�；卮鹣铝袉栴}：

（1）為了從富含多聚聯(lián)苯的環(huán)境中分離聯(lián)苯降解菌，培養(yǎng)基中加入多聚聯(lián)苯作為__________，該培養(yǎng)基屬于__________（填“選擇”或“鑒定”）培養(yǎng)基。

（2）若要對所分離的菌種進(jìn)行計數(shù)，除顯微鏡直接計數(shù)法以外還常用_______________法接種來進(jìn)行活菌計數(shù)，其原理是__________________________。

（3）若從聯(lián)苯降解菌中分離并得到純度較高的聯(lián)苯水解酶（蛋白質(zhì)），分離該酶常用的方法是_______法，采用該方法先分離出的是相對分子質(zhì)量______（填“較大”或“較小”）的蛋白質(zhì)。

（4）聯(lián)苯降解酶在實驗室里的降解率很高，但是實際污染環(huán)境的治理中降解率很低，這可能是因為________________。

Answer 1

【答案】唯一碳源 選擇 稀釋涂布平板 在稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面的一個菌落來源于（稀釋液中的）一個活菌 凝膠色譜 較大 實際污染環(huán)境中多聚聯(lián)苯不是唯一碳源，或其他環(huán)境條件導(dǎo)致聯(lián)苯水解酶的活性降低

【解析】

1、培養(yǎng)基按功能分：

選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選率，如加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌；

鑒別培養(yǎng)基：加入某種試劑或化學(xué)藥品依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物，如伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌。

2、凝膠色譜法的原理：凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)的有效方法，相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程長，移動的速度慢，相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動的速度快，因此相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)得以分離。

（1）為了從富含多聚聯(lián)苯的環(huán)境中分離聯(lián)苯降解菌，應(yīng)該用以多聚聯(lián)苯作為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。

（2）在對所分離的菌種進(jìn)行計數(shù)時，除用顯微鏡直接計數(shù)法以外還常用稀釋涂布平板法接種來進(jìn)行活菌計數(shù)，因為在稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面的一個菌落可認(rèn)為來源于（稀釋液中的）一個活菌。

（3）純化該酶常用的方法是凝膠色譜法，該方法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)的有效方法，相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程長，移動的速度慢，相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動的速度快，因此采用該方法先分離出分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)。

（4）由于在實際污染環(huán)境中多聚聯(lián)苯不是唯一碳源，或其他環(huán)境條件導(dǎo)致聯(lián)苯水解酶的活性降低，因此會出現(xiàn)聯(lián)苯降解酶在實驗室里的降解率很高，但是實際污染環(huán)境的治理中降解率很低的現(xiàn)象。