3.如圖是獲得人乳鐵蛋白的技術路線.(圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因,ampR表示氨芐青霉素抗性基因,BamHI、HindⅢ、SmaI三種限制酶的酶切位點如圖所示)

據(jù)圖回答:
(1)已知人乳鐵蛋白基因的全部序列,可通過人工合成法或PCR技術獲得人乳鐵蛋白基因.據(jù)圖分析,過程①表示基因表達載體的構建,該過程需要的限制酶是Hamd III和BamH I.圖中A所示的結構與調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄的有關部分是啟動子、終止子.
(2)篩選含有重組載體的大腸桿菌,培養(yǎng)基中應另添加氨芐青霉素.
(3)圖中過程②最常用的方法是顯微注射法.體外培養(yǎng)受精卵時,需將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng),CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的PH.
(4)圖中過程④(填序號)表示胚胎移植,在胚胎移植前要對代孕牛進行同期發(fā)情處理.

分析 分析題圖:圖示是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應器的技術路線,包括基因表達載體的構建、將目的基因?qū)胧荏w細胞、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等步驟,其中過程②是將重組質(zhì)粒導入受體細胞;過程④需采用胚胎移植技術.

解答 解:(1)已知人乳鐵蛋白基因的全部序列,可通過人工合成法或PCR技術獲得人乳鐵蛋白基因.過程①是基因表達載體的構建.外源DNA分子上含有限制酶BamHI、HindIII、SmaI的切割位點,其中限制酶SmaI的切割位點位于目的基因上,所以獲取目的基因和構建基因表達載體時,應用限制酶HindⅢ和BamHⅠ.A為基因表達載體,其中啟動子和終止子與基因轉(zhuǎn)錄有關.
(2)用限制酶HindⅢ和BamHⅠ切割質(zhì)粒后,會破壞質(zhì)粒上的四環(huán)素抗性基因,但不會破壞氨芐青霉素抗性基因,因此篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進行.
(3)過程②是將重組質(zhì)粒導入受體細胞,當受體細胞是動物細胞時,將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法.5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng),C02的主要作用是維持培養(yǎng)液的PH.
(4)過程④需要采用胚胎移植技術;在胚胎移植前要對代孕牛進行同期發(fā)情處理,使其處于相同的生理基礎.
故答案為:
(1)PCR  基因表達載體的構建   Hamd III和BamH I     啟動子、終止子
(2)氨芐青霉素
(3)顯微注射法    維持培養(yǎng)液的PH
(4)④同期發(fā)情

點評 本題結合乳腺生物反應器培育過程圖和曲線圖,考查基因工程、胚胎工程、基因頻率的變化及生物進化等知識,要求考生識記基因工程的工具和操作步驟,能準確判斷圖中各過程的名稱或采用的技術;識記胚胎分割技術的理論基礎,能提取圖中有效信息答題.

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