Question

（14分）胰島B細(xì)胞移植是一種有效治療糖尿病的方法。利用小鼠再生胰腺提取物（RPE)可定向誘導(dǎo)人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞（hAMSCs)分化成胰島B細(xì)胞。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1)取人羊膜組織刮除血塊、上皮細(xì)胞，沖洗后剪碎，然后用 酶處理，最終制成hAMSCs懸液。將細(xì)胞懸液放人培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)，當(dāng)細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)到一定階段時(shí)，出現(xiàn) 現(xiàn)象，此時(shí)細(xì)胞停止分裂增殖，這時(shí)需要將細(xì)胞進(jìn)行相關(guān)處理，然后進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

（2）取傳至第3代的hAMSCs放入細(xì)胞培養(yǎng)板，同時(shí)加入RPE進(jìn)行誘導(dǎo)分化培養(yǎng)。該代hAMSCs能保持細(xì)正常的 。誘導(dǎo)分化培養(yǎng)15天后，提取細(xì)胞的 ，用胰島素基因探針進(jìn)行分子雜交，可初步檢測(cè)hAMSCs是否分化成胰島B細(xì)胞。

（3）用人的雜交瘤細(xì)胞來(lái)生產(chǎn)人源單克隆抗體難以成功，因此單克隆抗體大都來(lái)自鼠源。但鼠源單抗在人體內(nèi)使用時(shí)，會(huì)產(chǎn)生較強(qiáng)的免疫原性，為解決這一問(wèn)題，發(fā)明了嵌合抗體。大致過(guò)程如下圖所示：

嵌合抗體能降低鼠源抗體的免疫原性，從上圖中可以推測(cè)，免疫原性的產(chǎn)生主要與抗體的 （選填“v區(qū) "、“c區(qū) "）有關(guān)。嵌合抗體的生產(chǎn)屬于 工程范疇。

（4）科學(xué)家們用細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)證明，分化的細(xì)胞中存在“閑置不用 " 的結(jié)構(gòu)基因。他們把大鼠肝腫瘤細(xì)胞和小鼠成纖維細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，篩選出含有兩套肝細(xì)胞染色體和一套成纖維細(xì)胞染色體的細(xì)胞。這些細(xì)胞既保持了合成大鼠肝細(xì)胞 3種特異蛋白的能力，也合成了小鼠肝細(xì)胞這3種蛋白，但是在正常的小鼠成纖維細(xì)胞中從不合成這些。由此可見(jiàn)，融合實(shí)驗(yàn)證明了小鼠成纖維細(xì)胞 。

Answer 1

（1）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶） 接觸抑制 （2）（二倍體）核型 RNA（或mRNA）

（3）C區(qū) 蛋白質(zhì)（4）含有不表達(dá)的但肝細(xì)胞專(zhuān)一表達(dá)的基因，在特定條件下這些“閑置基因”也可表達(dá)

【解析】

試題分析：（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前，需用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理組織獲取細(xì)胞懸液；當(dāng)細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象時(shí)，細(xì)胞停止分裂增殖。

（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞能保持正常的二倍體核型。提取細(xì)胞的mRNA，用胰島素基因探針進(jìn)行分子雜交，可初步檢測(cè)hAMSCs基因是否表達(dá)，即是否分化成胰島B細(xì)胞。

（3）從上圖可以看出，免疫原性的產(chǎn)生主要與抗體的C區(qū)有關(guān)。嵌合抗體的生產(chǎn)屬于蛋白質(zhì)工程。

（4）由題意可知，含有兩套肝細(xì)胞染色體和一套成纖維細(xì)胞染色體的細(xì)胞，既保持了合成大鼠肝細(xì)胞 3種特異蛋白的能力，也合成了小鼠肝細(xì)胞這3種蛋白，但是在正常的小鼠成纖維細(xì)胞中從不合成這些。由此可見(jiàn)，小鼠成纖維細(xì)胞含有不表達(dá)的但在肝細(xì)胞中可專(zhuān)一表達(dá)的基因，在特定條件下這些“閑置基因”也可表達(dá)。

考點(diǎn)：本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、嵌合抗體、細(xì)胞融合等知識(shí)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理，做出合理判斷或得出正確結(jié)論的能力。