Question

【題目】[生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題]

編碼蛋白甲的DNA序列（序列甲）由A、B、C、D、E五個(gè)片段組成，編碼蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段組成，如圖1所示。

回答下列問題：

（1）現(xiàn)要通過基因工程的方法獲得蛋白乙，若在啟動(dòng)子的下游直接接上編碼蛋白乙的DNA序列

（TTCGCTTCT……CAGGAAGGA），則所構(gòu)建的表達(dá)載體轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞后不能翻譯出蛋白乙，原因是_____________________________________。

（2）某同學(xué)在用PCR技術(shù)獲取DNA片段B或D的過程中，在PCR反應(yīng)體系中加入了DNA聚合酶、引物等，還加入了序列甲作為_____________________，加入了________________作為合成DNA的原料。

（3）現(xiàn)通過基因工程方法獲得了甲、乙、丙三種蛋白，要鑒定這三種蛋白是否具有刺激T淋巴細(xì)胞增殖的作用，某同學(xué)做了如下實(shí)驗(yàn)：將一定量的含T淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)液平均分成四組，其中三組分別加入等量的蛋白甲、乙、丙，另一組作為對照，培養(yǎng)并定期檢測T淋巴細(xì)胞濃度，結(jié)果如圖2。

①由圖2 可知，當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到a時(shí)，添加蛋白乙的培養(yǎng)液中T淋巴細(xì)胞濃度不再增加，此時(shí)若要使T淋巴細(xì)胞繼續(xù)增殖，可采用的方法是__________________。細(xì)胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度，CO2的作用是__________________。

②僅根據(jù)圖、圖2可知，上述甲、乙、丙三種蛋白中，若缺少______________（填“A”“B”“C”“D”或“E”）片段所編碼的肽段，則會(huì)降低其刺激T淋巴細(xì)胞增殖的效果。

Answer 1

【答案】 編碼乙的DNA序列起始端無ATG，轉(zhuǎn)錄出的mRNA無起始密碼子 模板 dNTP 進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng) 維持培養(yǎng)液是的pH C

【解析】（1）題干信息基因序列（TTCG……)，結(jié)合轉(zhuǎn)錄過程中的堿基配對原則，可知其轉(zhuǎn)錄出的mRNA上沒有起始密碼子AUG。（2）PCR需要的條件包括引物、耐高溫的DNA聚合酶、模板、四種脫氧核糖核苷酸。（3）①動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中，細(xì)胞具有貼壁生長以及接觸抑制的特點(diǎn)，因此若要使T淋巴細(xì)胞繼續(xù)增殖，在培養(yǎng)中需要用胰蛋白酶處理貼壁的細(xì)胞并進(jìn)行分瓶培養(yǎng)，分瓶后的培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中加入CO2，作用是維持培養(yǎng)液的pH。②據(jù)圖分析，丙與對照接近，甲和乙都有較大影響，在甲、乙中存在但在丙中不存在的片段是C，所以缺少C片段會(huì)降低效果。