47．(7分)番茄果實(shí)成熟過(guò)程中，某種酶(PG)開(kāi)始合成并顯著增加，促使果實(shí)變紅變軟。但不利于長(zhǎng)途運(yùn)輸和長(zhǎng)期保鮮�？茖W(xué)家利用反義RNA技術(shù)(見(jiàn)圖解)，可有效解決此問(wèn)題。該技術(shù)的核心是，從番茄體細(xì)胞中獲得指導(dǎo)PG合成的信使RNA，繼而以該信使RNA為模板人工合成反義基因并將之導(dǎo)入離體番茄體細(xì)胞，經(jīng)組織培養(yǎng)獲得完整植株。新植株在果實(shí)發(fā)育過(guò)程中，反義基因經(jīng)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的反義RNA與細(xì)胞原有mRNA(靶mRNA)互補(bǔ)形或雙鏈RNA，阻止靶mRNA進(jìn)一步翻譯形成PG，從而達(dá)到抑制果實(shí)成熟的目的。請(qǐng)結(jié)合圖解回答：

(1)若要將人工合成的完整反義基因克隆出成百上千的反義基因，可用        (寫(xiě)出中文名稱)技術(shù)實(shí)現(xiàn)體外快速擴(kuò)增。

(2)假設(shè)PCR反應(yīng)中的初始只有一個(gè)DNA作為模板， n輪循環(huán)的產(chǎn)物中含有模板DNA鏈的DNA分子有     個(gè)、含有人工合成的DNA引物的DNA分子有    個(gè)。若DNA分子中共含900個(gè)堿基對(duì)，堿基數(shù)量滿足：(A+T)／(G+C)=1／2，經(jīng)5次循環(huán)，至少需要向試管中加入     個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸(不考慮引物所對(duì)應(yīng)的片段)。

(3)PCR反應(yīng)中所用到的酶是      ，其具有       的特性。

(4)普通番茄細(xì)胞導(dǎo)入目的基因后，先要接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，脫分化后得到           ，再轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)出試管苗，然后進(jìn)一步培養(yǎng)成正常植株。

 46．（9分）下圖為單克隆抗體制備流程示意圖。

(1)             技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。

(2)細(xì)胞融合是隨機(jī)的過(guò)程，在HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)的目的是        。在培養(yǎng)過(guò)程中為防止雜菌感染，應(yīng)向培養(yǎng)液中添加              ；其體外培養(yǎng)需用CO²培養(yǎng)箱，其中CO²的主要作用是           。

(3)動(dòng)物細(xì)胞融合除了采用植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合常用誘導(dǎo)劑外，還可以采用              。

(4)雜交瘤細(xì)胞從培養(yǎng)基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是         。

(5)單克隆抗體與傳統(tǒng)抗體相比，其優(yōu)點(diǎn)是            。(3分)

45．抗維生素D佝僂病是伴X顯性遺傳病(用D、d表示該對(duì)等位基因)。甲為該病患者，其丈夫正�！，F(xiàn)對(duì)孕婦甲及其丈夫和他們的雙胞胎孩子用探針進(jìn)行基因診斷。檢測(cè)基因d的探針為d探針，檢測(cè)基因D的探針為D探針。觀察到如下結(jié)果(空圈代表無(wú)放射性，深顏色圈放射性強(qiáng)度是淺顏色圈的2倍)。根據(jù)雜交結(jié)果，下列說(shuō)法不正確的是

A．個(gè)體2、3的基因型分別是X^dY、X^dX^d

B．若個(gè)體l與表現(xiàn)型正常的異性婚配，后代中女性患病率約為50％

C．若這對(duì)夫婦生一男孩，則其正常的概率為1／2

D．他們的雙胞胎后代一定來(lái)自兩個(gè)受精卵

44．  “篩選”是生物工程中常用的技術(shù)手段，下列關(guān)于篩選的敘述中正確的有幾項(xiàng)

①重組質(zhì)粒上的標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)②單克隆抗體制各過(guò)程中，在完成細(xì)胞融合后，第一次篩選出的是雜交瘤細(xì)胞③單克隆抗體制備過(guò)程中，在完成細(xì)胞融合后，第二次篩選出的是針對(duì)目標(biāo)抗原的抗體檢驗(yàn)為陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞④基因工程中用同種限制性核酸內(nèi)切酶切割運(yùn)載體和目的基因，酶切產(chǎn)物用DNA連接酶連接，為了保證成功率，需將獲得韻產(chǎn)物篩選后導(dǎo)入受體細(xì)胞⑤為了快速繁殖無(wú)子西瓜，需篩選出特定的體細(xì)胞才能進(jìn)行組織培養(yǎng)

  A．二項(xiàng)    B．三項(xiàng)    C．四項(xiàng)    D．五項(xiàng)

43．下列利用普通二倍體魚(yú)培育三倍體轉(zhuǎn)基因魚(yú)的技術(shù)不合理的是

  A．讓二倍體魚(yú)的精子染色體數(shù)目加倍再受精

  B．將目的基因?qū)�入二倍體或四倍體的受精卵

  C．將轉(zhuǎn)基因四倍體純種與二倍體進(jìn)行雜交 

D．設(shè)法使染色體數(shù)目加倍以獲得四倍體

42．根據(jù)每個(gè)細(xì)胞中核DNA相對(duì)含量的不同，將某高等哺乳動(dòng)物精巢中連續(xù)增殖的精原細(xì)胞歸為A、B、C三組，每組細(xì)胞數(shù)目如圖l所示；將精巢中參與配子形成過(guò)程的細(xì)胞歸為D，E，F(xiàn)三組，每組細(xì)胞數(shù)目如圖2所示；根據(jù)細(xì)胞中每條染色體上DNA含量在細(xì)胞周期中的變化繪制曲線，如圖3所示。下列敘述中錯(cuò)誤的是

  A．圖l中C組的細(xì)胞不都位于圖3的乙-丙段

  B．如果對(duì)圖l的精原細(xì)胞進(jìn)行處理，使其DNA不能復(fù)制，則一段時(shí)間后A組細(xì)胞數(shù)目增加，C組細(xì)胞數(shù)目減少

  C．圖2中F組細(xì)胞變成E組細(xì)胞的過(guò)程發(fā)生在圖3的乙-丙段

  D．圖2中D組和E組細(xì)胞均不含同源染色體

41．降鈣素是一種多肽類激素，臨床上用于治療骨質(zhì)疏松癥等。人的降鈣素活性很低，半衰期較短。某科學(xué)機(jī)構(gòu)為了研發(fā)一種活性高、半衰期長(zhǎng)的新型降鈣素，從預(yù)期新型降鈣素的功能出發(fā)，推測(cè)相應(yīng)的脫氧核苷酸序列，并人工合成了兩條72個(gè)堿基的DNA單鏈，兩條鏈通過(guò)18個(gè)堿基對(duì)形成部分雙鏈DNA片段，再利用Klenow酶補(bǔ)平，獲得雙鏈DNA，過(guò)程如下圖：

獲得的雙鏈DNA經(jīng)EcoRI(識(shí)別序列和切割位點(diǎn)和BamHI(識(shí)別序列和切割位點(diǎn))雙酶切后插入大腸桿菌質(zhì)粒中。下列有關(guān)分析錯(cuò)誤的是

  A．Klenow酶是一種DNA聚合酶    B．合成的雙鏈DNA有144個(gè)堿基對(duì)

  C．EcoRI和BamHI雙酶切的目的是保證目的基因和運(yùn)載體的定向連接

  D．篩選重組質(zhì)粒需要大腸桿菌質(zhì)粒中含有標(biāo)記基因

40．雙脫氧核苷酸常用于DNA測(cè)序，其結(jié)構(gòu)與脫氧核苷酸相似，能參與DNA的合成，且遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則。DNA合成時(shí)，在DNA聚合酶作用下，若連接上的是雙脫氧核苷酸，子鏈延伸終止；若連接上的是脫氧核苷酸，子鏈延伸繼續(xù)。在人工合成體系中，有適量的序列為GTACATACATG的單鏈模板、腺嘌呤雙脫氧核苷酸和4種脫氧核苷酸。則以該單鏈為模板合成出的不同長(zhǎng)度的子鏈最多有

  A．2種  B．3種  C．4種  D．5種

39．植株甲是二倍體水稻，利用植株甲獲得了植株乙，而后利用植株甲和乙又獲得了植株丙和丁。培養(yǎng)過(guò)程如右圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是

  A．用秋水仙素處理植株甲的雌蕊柱頭可獲得植株乙

  B．植株丙與植株丁的體細(xì)胞中染色體組的數(shù)目相同

  C．植株甲與植株乙正交和反交所得種子的胚乳的基因型不同

  D．植株丙和植株丁的獲得說(shuō)明植株甲與植株乙是一個(gè)物種 

38．下列關(guān)于愈傷組織的說(shuō)法正確的是

A．愈傷組織的代謝類型是自養(yǎng)需氧型

B．以同一株綠色開(kāi)花植物的任何細(xì)胞經(jīng)組織培養(yǎng)獲得的愈傷組織的基因型均相同

C．不可以通過(guò)將人工種皮包裹愈傷組織的方法獲得人工種子

D．愈傷組織由高度分化的細(xì)胞組成