現(xiàn)有甲、乙兩種可能有一定毒性的化學(xué)物質(zhì)，實驗室研究人員欲通過動物細(xì)胞培養(yǎng)的方法來鑒定它們是否有毒性并比較二者毒性的強弱。請你以一個研究人員的身份參與此項研究，完成下列有關(guān)問題：   
Ⅰ．實驗原理：                                                。
根據(jù)這種變異細(xì)胞占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)（以下稱Q值），可判斷該化學(xué)物質(zhì)的毒性。
Ⅱ．材料用具：活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、動物細(xì)胞培養(yǎng)液、動物細(xì)胞固定液、適宜濃度的龍膽紫溶液、適宜濃度的化學(xué)物質(zhì)甲溶液、適宜濃度的化學(xué)物質(zhì)乙溶液、蒸餾水、滴管、培養(yǎng)皿、剪刀、錐形瓶、恒溫箱、載玻片、蓋玻片、顯微鏡、小白鼠正常有絲分裂各時期的高倍顯微照片。
Ⅲ．實驗步驟：
（1）制備細(xì)胞懸浮液。
把活的小白鼠胚胎放在培養(yǎng)皿中剪碎，轉(zhuǎn)入錐形瓶中，加入胰蛋白酶液處理，使胚胎組織離散成單個細(xì)胞，再加入動物細(xì)胞培養(yǎng)液，制成細(xì)胞懸浮液。
（2）進行細(xì)胞培養(yǎng)。
①取A、B、C 3個潔凈的培養(yǎng)瓶，                       ；
②A、B兩個培養(yǎng)瓶中分別加入等量的甲、乙溶液。C瓶中加入等量的蒸餾水，搖勻；
③                                                       
（3）制作臨時裝片。
①當(dāng)細(xì)胞增殖到大約8代左右時，同時從恒溫箱中取出3個培養(yǎng)瓶，用胰蛋白酶液處理，加入動物細(xì)胞固定液，迅速殺死細(xì)胞并固定細(xì)胞分裂相；
②靜置一段時間后，分別從各培養(yǎng)瓶底部吸取適量的細(xì)胞懸浮液，滴在與培養(yǎng)瓶有相同編號的載玻片的中央，                                   ，3min~5min后，蓋上蓋玻片。
（4）鏡檢和統(tǒng)計。
把臨時裝片放在顯微鏡下，先用低倍鏡后用高倍鏡，尋找處于            期的細(xì)胞，并與                 進行對比，統(tǒng)計并計算該期變異的細(xì)胞占該期細(xì)胞總數(shù)的百分?jǐn)?shù)（Q值）。
Ⅳ．結(jié)果分析與結(jié)論：
（1）經(jīng)研究人員實驗得知，A、B、C三個培養(yǎng)瓶的Q值依次為：QA=1.3%，QB=12.5%，QC=0.1%，由此可知該實驗的結(jié)論是                                       。
（2）在實驗中，C培養(yǎng)瓶起        作用，C瓶的Q值說明                   。

下圖為培育轉(zhuǎn)基因小鼠的部分過程示意圖。請回答下列問題：

（1）若需在短時間內(nèi)獲得較多的外源基因，通常采用       技術(shù)。
（2）圖中的A細(xì)胞通常為     細(xì)胞，將外源基因?qū)�入該�?xì)胞常用的方法是         。
（3）仔鼠出生后可用其尾巴進行DNA檢測，通過        方法，檢測出攜帶外源基因的小鼠。至于外源基因是否合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)，可從轉(zhuǎn)基因小鼠中提取蛋白質(zhì)，并用相應(yīng)的抗體進行      雜交，若有雜交帶出現(xiàn)，則表明小鼠體內(nèi)的外源基因           。
（4）在外源基因?qū)�入小鼠的A細(xì)胞時，外源基因可能隨機地插入到該細(xì)胞的DNA中。這些細(xì)胞有的能發(fā)育成轉(zhuǎn)基因小鼠，有的卻死亡。請分析外源基因插入后導(dǎo)致有些A細(xì)胞死亡的最可能原因                                               。

胚胎工程技術(shù)包含的內(nèi)容很豐富，下圖是胚胎工程技術(shù)研究及應(yīng)用的相關(guān)情況，其中供體1是良種荷斯坦高產(chǎn)奶牛，供體2是黃牛，請據(jù)圖回答下列問題：

（1）應(yīng)用1中獲得的小牛，其遺傳物質(zhì)來源于              ，為一次獲得多個細(xì)胞B，往往需要向供體2內(nèi)注入的是促性腺激素，而不是性激素，原因是                                    。
（2）將優(yōu)良公牛的精子收集后放在一定濃度的肝素溶液中進行培養(yǎng)，其目的是                                   。
（3）通過應(yīng)用2獲得小牛，涉及到胚胎工程的最后一道“工序”是               。
（4）應(yīng)用3中的細(xì)胞D取自囊胚的          ，細(xì)胞C取自牛胎兒的           。
（5）應(yīng)用4中獲得二分胚①和②，移植到受體牛中得到兩只小牛，兩只小牛的性別是           。

基因克隆是對分離出來的目的基因進行大量擴增的過程。經(jīng)過基因克隆，可以生產(chǎn)出大量的目的基因或在基因表達(dá)時獲得大量的蛋白質(zhì)。細(xì)菌質(zhì)粒是基因克隆的合適載體，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，某些細(xì)菌質(zhì)粒中含有兩個抗生素抗性基因——氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因，而且，在四環(huán)素抗性基因中存在限制酶的單一識別序列。
下圖表示利用質(zhì)粒進行基因克隆的過程，其中A-D表示物質(zhì)，I和II表示抗性基因，①—⑦表示過程，其它數(shù)字表示菌落，據(jù)圖回答下列問題：

（1）寫出下列字母和編號的名稱：A：        ； II：         。
（2）將A和B形成D所需的酶是       。⑤過程中為提高成功率，常用       溶液處理大腸桿菌。
（3）為篩選含有物質(zhì)A的細(xì)菌，需進行細(xì)菌培養(yǎng)，先在培養(yǎng)基（一）中只加入氨芐青霉素，一段時間后，培養(yǎng)基上長出的細(xì)菌菌落具有       特性。然后，用滅菌絨布從培養(yǎng)基（一）中蘸取菌種，再按到只含四環(huán)素的培養(yǎng)基（二）中培養(yǎng)。根據(jù)培養(yǎng)基（一）和（二）上的細(xì)菌生長情況，可以判斷圖中菌落       （填數(shù)字）即為篩選出的含有物質(zhì)A的細(xì)菌，原因是                                       。

研究性學(xué)習(xí)小組參觀某市市郊建立的以沼氣為中心，以保護生態(tài)環(huán)境為目標(biāo)的“豬—沼—魚—肥—果蔬”生態(tài)模式時繪出了如下模式圖，請分析回答：

（1）構(gòu)建以沼氣為中心的“豬—沼—魚—肥—果蔬”生態(tài)模式時主要依據(jù)的生態(tài)學(xué)原理 是                　，該生態(tài)系統(tǒng)最大的優(yōu)點是　　   　        　    。
（2）該生態(tài)系統(tǒng)的“基石”是　   ，若要生產(chǎn)3kg雞肉最少需要水稻和大豆共　　kg。
（3）沼氣池中的產(chǎn)甲烷菌在生態(tài)學(xué)上的作用主要是                     　    。
（4）若農(nóng)田內(nèi)有害蟲發(fā)生，采用何種措施既能保護環(huán)境又能有效防治害蟲？（寫出2種）
                                                                        
（5）從生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)循環(huán)分析，焚燒秸稈對農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)的影響是________________，焚燒秸桿主要破壞了生態(tài)工程的哪一原理？__________________。

重癥聯(lián)合性免疫缺陷病是一種體液免疫、細(xì)胞免疫同時有嚴(yán)重缺陷的疾�。ê喎QSCID），這種患者缺乏正常的人體免疫功能，只要稍被細(xì)菌或病毒感染，就會發(fā)病死亡。經(jīng)研究證實，SCID病人細(xì)胞的一個常染色體上編碼腺苷酸脫氨酶（簡稱ADA）的基因ada發(fā)生了突變。目前，人們已經(jīng)找到了治療該疾病的方案。如下圖：

（1）下列不是運載體必須具備的是（    ）
A．能在宿主細(xì)胞中復(fù)制并保存     B．具有多個限制酶切點，以便與外源基因連接
C．具有標(biāo)記基因，便于進行篩選     D．是環(huán)狀形態(tài)的DNA分子
（2）在此圖過程中用到的基因操作工具分別是                                 。
（3）研究人員將ada注入淋巴細(xì)胞，而不是其他細(xì)胞，其原因是什么？           。
（4）圖中的治療方法是_______（體內(nèi)或體外）基因治療法，這是______   _____生物技術(shù)的應(yīng)用。請列舉除了在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，該生物技術(shù)在其他領(lǐng)域的一些成就：               。
（5）SCID病人的血液能作為實驗“DNA粗提取與鑒定”的實驗材料嗎？      ，為什么？
                                                             

2N/4N 嵌合體胚胎是指用四倍體 (4N )胚胎與二倍體胚胎(2N )或胚胎干細(xì)胞 (ES 細(xì)胞)進行聚合，形成由二倍體和四倍體細(xì)胞組成的嵌合體。2N/4N 嵌合體胚胎的構(gòu)建常用方法如下圖，請據(jù)圖分析回答：
 
（1）受精卵是胚胎發(fā)育的開端，圖中的卵細(xì)胞達(dá)到                 時期，才具備受精的能力，而精子需經(jīng)過             過程才能和卵細(xì)胞結(jié)合。
（2）2N的ES細(xì)胞來自胚胎發(fā)育過程的             期，本實驗中從功能上說明了該細(xì)胞                  。
（3）2n/4n 嵌合體胚胎的構(gòu)建用到的現(xiàn)代生物工程技術(shù)主要有：                   

野生馬鈴薯品種的植株具有較強的抗病、抗蟲、抗鹽堿、抗寒能力，但塊莖不能食用。俄、德、芬蘭專家共同做實驗研究，用野生馬鈴薯與馬鈴薯的體細(xì)胞進行雜交，培育出了生活能力強的雜交系馬鈴薯。
(1)專家在實驗中，需用到的酶主要有               和            酶等。
(2)專家在實驗中，需要用到聚乙二醇（PEG），其目的是                   。
(3)農(nóng)民種植雜交系馬鈴薯除可獲得較高的收成外，還有什么優(yōu)點？（寫出兩點）。
                                                                    
(4)運用此植物體細(xì)胞雜交法可使本來存在著生殖隔離的物種進行雜交，培育出兼有兩物種品質(zhì)的優(yōu)良物種，最好用下列哪種方法？              （   ）

目前所用的質(zhì)粒載體主要是以天然細(xì)菌質(zhì)粒的各種元件為基礎(chǔ)重新組建的人工質(zhì)粒，pBR322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體，其主要結(jié)構(gòu)如圖所示。

(1)構(gòu)建人工質(zhì)粒時要有抗性基因，以便于                              。
(2)pBR322分子中有單個EcoR I限制酶作用位點，EcoR 1只能識別序列一GAATTC一，并只能在G與A之間切割。若在某目的基因的兩側(cè)各有1個EcoR I的切點，請畫出目的基因兩側(cè)被限制酶EcoR I切割后所形成的黏性末端。
                                                                      
(3)pBR322分子中另有單個的BamHI限制酶作用位點，現(xiàn)將經(jīng)BamHI處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶BgIⅡ處理得到的目的基因，通過DNA連接酶作用恢復(fù)___    ___ 鍵，成功的獲得了重組質(zhì)粒。
(4)為了檢測上述重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入原本無ampR和tetR的大腸桿菌，將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖二的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上，使絨布面沾上菌落，然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖三的結(jié)果(空圈表示與圖二對照無菌落的位置)。與圖三空圈相對應(yīng)的圖二中的菌落表現(xiàn)型是___      _____ ，圖三結(jié)果顯示，多數(shù)大腸桿菌導(dǎo)入的是___           __。

2008年諾貝爾化學(xué)獎授予了三位在研究綠色熒光蛋白（GFP）方面做出突出貢獻的科學(xué)家。綠色熒光蛋白能在藍(lán)光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光，這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)部的移動情況，幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。下圖為我國首例綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖，據(jù)圖回答：
   注：圖中通過過程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制性內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識別序列和切點是—G^↓GATCC—，限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識別序列和切點是—^↓GATC—。在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個切點，在目的基因的兩側(cè)各有1個酶Ⅱ的切點。
（1）在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來       ，理由是：                                 。
（2）過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時，采用最多的方法是         。
（3）如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上，GFP基因可以作為基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因，其作用是         。獲得的轉(zhuǎn)基因克隆豬，可以解決的醫(yī)學(xué)難題是，可以避免                       。
（4）目前科學(xué)家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過程的正確順序是：          （用數(shù)字表示）。
①推測藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計序列
③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾（合成）
④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白。