【生物一現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題】科學(xué)家將魚(yú)抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄理科的耐寒能力大大提高，可以在相對(duì)寒冷的環(huán)境中生長(zhǎng)。質(zhì)粒上有Pst I 、sma II 、Hind III 、Alul 等四種限制酶切割位點(diǎn)，下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過(guò)程的示意圖（ampr 為抗氨芐青霉素基因），其中①——④ 是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過(guò)程中的相關(guān)步驟，I 、II 表示相關(guān)結(jié)構(gòu)或細(xì)胞。請(qǐng)據(jù)圖作答：

（l）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，可用一種或者多種限制酶進(jìn)行切割。為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，在此實(shí)例中，應(yīng)該選用限制酶，分別對(duì)       進(jìn)行切割，切割后產(chǎn)生的DNA 片段分別為       種。

（2）培養(yǎng)基中的氨芐青霉素會(huì)抑制番茄愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，要利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入含魚(yú)的抗凍蛋白基因的番茄細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體I 中含有         作為標(biāo)記基因。

（3）研究人員通常采用        法將魚(yú)抗凍蛋白基因?qū)�入番茄�?xì)胞內(nèi)。通常采用       技術(shù)，在分子水平檢測(cè)目的基因是否翻譯形成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)。

（4）利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入含魚(yú)的抗凍蛋白基因的番茄組織細(xì)胞培育成植株。圖中③、④依次表示組織培養(yǎng)過(guò)程中香蕉組織細(xì)胞的              過(guò)程。

【生物一現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題】

國(guó)家863計(jì)劃項(xiàng)目“利用嶗山奶山羊乳腺生物反應(yīng)器制備藥用蛋白”取得重大進(jìn)展。目前，已經(jīng)成功獲得經(jīng)純化的抗凝血酶III蛋白，達(dá)到國(guó)際先進(jìn)水平。下面是制作嶗山奶山羊乳腺生物反應(yīng)器的流程圖：

   （1）根據(jù)流程圖分析，動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器主要利用了_____技術(shù)、胚胎工程技術(shù)和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。

   （2）要實(shí)現(xiàn)①超數(shù)排卵，應(yīng)在嶗山奶山羊A發(fā)情周期的某一階段用______處理，然后在恰當(dāng)時(shí)期進(jìn)行        收集卵子。通過(guò)②采集的精子不能直接使成熟的卵子受精，原因是____________________________________________________________

   （3）過(guò)程④需將抗凝血酶III基因注入受精卵的雄原核內(nèi)，在顯微鏡下判斷是否完成受精作用的標(biāo)志是________________________。

   （4）要使人的抗凝血酶III基因在山羊乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)，完整的基因表達(dá)載體要包括目的基因、__________、標(biāo)記基因等部分。在⑤之前要檢測(cè)早期胚胎細(xì)胞是否已經(jīng)導(dǎo)人抗凝血酶III基因，宜采用_________________技術(shù)

   （5）若要一次獲得多只完全相同的轉(zhuǎn)基因嶗山奶山羊D，⑤應(yīng)采用_____________技術(shù)。

【生物一現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題】

我們?nèi)粘３缘拇竺字需F含量極低，科研人員通過(guò)基因工程等技術(shù)，培育出了鐵含量比普通大米高60％的轉(zhuǎn)基因水稻，改良了稻米的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)。下圖為培育轉(zhuǎn)基因水稻過(guò)程示意圖，請(qǐng)回答：

(1)在上述工程中，鐵結(jié)合蛋白基因稱(chēng)為_(kāi)___________，獲取該基因后常用___________技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。

(2)構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒時(shí)，通常要用同種限制酶分別切割___________和__________。將重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌時(shí)，可以用___________處理農(nóng)桿菌，使重組Ti質(zhì)粒易于導(dǎo)入。

(3)將含有重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌與水稻愈傷組織共同培養(yǎng)時(shí)，通過(guò)培養(yǎng)基2的篩選培養(yǎng)，可以獲得__________；培養(yǎng)基3與培養(yǎng)基2的區(qū)別是_________。

(4)檢測(cè)培育轉(zhuǎn)基因水稻的目的是否達(dá)到，需要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因水稻____________。

35.   【生物一現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題】（8分）

科學(xué)家發(fā)現(xiàn)人的第5號(hào)染色體中的PITXl基因能遏制端粒酶發(fā)揮作用，將該基因移植到實(shí)驗(yàn)鼠的癌細(xì)胞中，能使得癌細(xì)胞無(wú)法增殖。請(qǐng)分析回答問(wèn)題：

(1)在上述轉(zhuǎn)基因過(guò)程中用到的工具有______，PITXI基因稱(chēng)為_(kāi)_____。

(2)將該基因移植到實(shí)驗(yàn)鼠的癌細(xì)胞的過(guò)程中，其操作的核心步驟為_(kāi)_____,標(biāo)記基因的作用是______。

(3)在配制動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液時(shí)，通常加入______等天然成分，在培養(yǎng)癌細(xì)胞的過(guò)程中，______ (會(huì)、不會(huì)）出現(xiàn)接觸抑制。

(4)用鼠的骨髓瘤細(xì)胞與人的某種漿細(xì)胞融合，得到的雜交瘤細(xì)胞既能______，又能______。

35.  【生物一現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題】（8分）

科學(xué)家發(fā)現(xiàn)人的第5號(hào)染色體中的PITXl基因能遏制端粒酶發(fā)揮作用，將該基因移植到實(shí)驗(yàn)鼠的癌細(xì)胞中，能使得癌細(xì)胞無(wú)法增殖。請(qǐng)分析回答問(wèn)題：

(1)在上述轉(zhuǎn)基因過(guò)程中用到的工具有______，PITXI基因稱(chēng)為_(kāi)_____。

(2)將該基因移植到實(shí)驗(yàn)鼠的癌細(xì)胞的過(guò)程中，其操作的核心步驟為_(kāi)_____,標(biāo)記基因的作用是______。

(3)在配制動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液時(shí)，通常加入______等天然成分，在培養(yǎng)癌細(xì)胞的過(guò)程中，______ (會(huì)、不會(huì)）出現(xiàn)接觸抑制。

(4)用鼠的骨髓瘤細(xì)胞與人的某種漿細(xì)胞融合，得到的雜交瘤細(xì)胞既能______，又能______。