（多選）在基因工程中，作為基因運(yùn)輸工具的運(yùn)載體，必須具備的條件有             （    ）

A．能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制，并穩(wěn)定地保存    

B．具有多個(gè)限制酶切點(diǎn)

C．必須是細(xì)菌的質(zhì)粒或噬菌體              

D．具有某些標(biāo)記基因

作為基因工程中的運(yùn)載體應(yīng)具備的條件不包括（）

1. A.
   能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定地保存
2. B.
   有多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便與外源基因連接
3. C.
   都是環(huán)狀雙鏈DNA分子
4. D.
   都有便于篩選的標(biāo)記基因

作為基因工程中的運(yùn)載體應(yīng)具備的條件不包括（　　）

A．能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定地保存

B．有多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便與外源基因連接

C．都是環(huán)狀雙鏈DNA分子

D．都有便于篩選的標(biāo)記基因

A．能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定地保存

B．有多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便與外源基因連接

C．都是環(huán)狀雙鏈DNA分子

D．都有便于篩選的標(biāo)記基因

ch1L基因是藍(lán)藻擬核DNA上與葉綠素合成有關(guān)的基因。為研究該基因?qū)θ~綠素合成的控制，需要構(gòu)建該種生物缺失ch1L基因的變異株細(xì)胞。構(gòu)建過(guò)程如下：

第①步：用PCR技術(shù)從藍(lán)藻環(huán)狀DNA中擴(kuò)增出ch1L基因片段。

第②步：將ch1L基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成重組質(zhì)粒1。

第③步：將重組質(zhì)粒1中ch1L基因中部0.8kb片段刪除，用一段紅霉素抗性基因取代之，得到重組質(zhì)粒2。

第④步：將重組質(zhì)粒2導(dǎo)入藍(lán)藻細(xì)胞，由于改造后的基因與ch1L基因仍有很長(zhǎng)的序列相同，所以能準(zhǔn)確地與其發(fā)生同源重組，產(chǎn)生出缺失ch1L基因的突變株。請(qǐng)根據(jù)上述資料，回答下列問(wèn)題：

（1）第①步用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA片段時(shí)用到的耐高溫的酶通常是指什么酶？         。

PCR擴(kuò)增DNA時(shí)必須加入引物，引物的實(shí)質(zhì)是          ，其作用是                                。

（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA一般要經(jīng)過(guò)三十多次循環(huán)，每次循環(huán)都要經(jīng)過(guò)三個(gè)步驟，其中“復(fù)性”這一步驟發(fā)生的變化是                   。為消除PCR擴(kuò)增過(guò)程當(dāng)中外源DNA污染造成的影響，應(yīng)如何設(shè)置對(duì)照？                       。

（3）構(gòu)建重組質(zhì)粒1、2時(shí)，為保證成功率，往往使用                        酶

對(duì)基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割，以切出相同的黏性末端，便于連接。此酶的作用是將DNA分子的              鍵打開(kāi)。

（4）質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體，其化學(xué)本質(zhì)是         ，此外還可用噬菌體、動(dòng)植物病毒作用為運(yùn)載體。

（5）導(dǎo)入重組質(zhì)粒2以后，往往還需要進(jìn)行檢測(cè)和篩選，可用            制成探針，檢測(cè)是否導(dǎo)入了重組基因，在培養(yǎng)基中加入              可將變異株細(xì)胞篩選出來(lái)。

（10分）ch1L基因是藍(lán)藻擬核DNA上與葉綠素合成有關(guān)的基因。為研究該基因?qū)θ~綠素合成的控制，需要構(gòu)建該種生物缺失ch1L基因的變異株細(xì)胞。構(gòu)建過(guò)程如下：

第①步：用PCR技術(shù)從藍(lán)藻環(huán)狀DNA中擴(kuò)增出ch1L基因片段。
第②步：將ch1L基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成重組質(zhì)粒1。
第③步：將重組質(zhì)粒1中ch1L基因中部0.8kb片段刪除，用一段紅霉素抗性基因取代之，得到重組質(zhì)粒2。
第④步：將重組質(zhì)粒2導(dǎo)入藍(lán)藻細(xì)胞，由于改造后的基因與ch1L基因仍有很長(zhǎng)的序列相同，所以能準(zhǔn)確地與其發(fā)生同源重組，產(chǎn)生出缺失ch1L基因的突變株。請(qǐng)根據(jù)上述資料，回答下列問(wèn)題：
（1）第①步用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA片段時(shí)用到的耐高溫的酶通常是指什么酶？        。
PCR擴(kuò)增DNA時(shí)必須加入引物，引物的實(shí)質(zhì)是         ，其作用是                               。
（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA一般要經(jīng)過(guò)三十多次循環(huán)，每次循環(huán)都要經(jīng)過(guò)三個(gè)步驟，其中“復(fù)性”這一步驟發(fā)生的變化是                  。為消除PCR擴(kuò)增過(guò)程當(dāng)中外源DNA污染造成的影響，應(yīng)如何設(shè)置對(duì)照？                      。
（3）構(gòu)建重組質(zhì)粒1、2時(shí)，為保證成功率，往往使用                       酶
對(duì)基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割，以切出相同的黏性末端，便于連接。此酶的作用是將DNA分子的             鍵打開(kāi)。
（4）質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體，其化學(xué)本質(zhì)是        ，此外還可用噬菌體、動(dòng)植物病毒作用為運(yùn)載體。
（5）導(dǎo)入重組質(zhì)粒2以后，往往還需要進(jìn)行檢測(cè)和篩選，可用           制成探針，檢測(cè)是否導(dǎo)入了重組基因，在培養(yǎng)基中加入             可將變異株細(xì)胞篩選出來(lái)。

ch1L基因是藍(lán)藻擬核DNA上與葉綠素合成有關(guān)的基因。為研究該基因?qū)θ~綠素合成的控制，需要構(gòu)建該種生物缺失ch1L基因的變異株細(xì)胞。構(gòu)建過(guò)程如下：

第①步：用PCR技術(shù)從藍(lán)藻環(huán)狀DNA中擴(kuò)增出ch1L基因片段。

第②步：將ch1L基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成重組質(zhì)粒1。

第③步：將重組質(zhì)粒1中ch1L基因中部0.8kb片段刪除，用一段紅霉素抗性基因取代之，得到重組質(zhì)粒2。

第④步：將重組質(zhì)粒2導(dǎo)入藍(lán)藻細(xì)胞，由于改造后的基因與ch1L基因仍有很長(zhǎng)的序列相同，所以能準(zhǔn)確地與其發(fā)生同源重組，產(chǎn)生出缺失ch1L基因的突變株。請(qǐng)根據(jù)上述資料，回答下列問(wèn)題：

（1）第①步用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA片段時(shí)用到的耐高溫的酶通常是指什么酶？           。

PCR擴(kuò)增DNA時(shí)必須加入引物，其作用是                                         。

（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA一般要經(jīng)過(guò)三十多次循環(huán)，每次循環(huán)都要經(jīng)過(guò)三個(gè)步驟，其中“復(fù)性”這一步驟發(fā)生的變化是                                          。

（3）構(gòu)建重組質(zhì)粒1、2時(shí)，為保證成功率，往往使用                                  酶對(duì)基 因和質(zhì)粒進(jìn)行切割，以切出相同的黏性末端，便于連接。此酶的作用是將DNA分子的               鍵打開(kāi)。

（4）質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體，其化學(xué)本質(zhì)是                      ，此外還可用噬菌體、動(dòng)植物病毒作用為運(yùn)載體。

（5）導(dǎo)入重組質(zhì)粒2以后，往往還需要進(jìn)行檢測(cè)和篩選，可用                   制成探針，檢測(cè)是否導(dǎo)入了重組基因，在培養(yǎng)基中加入              可將變異株細(xì)胞篩選出來(lái)。

（10分）ch1L基因是藍(lán)藻擬核DNA上與葉綠素合成有關(guān)的基因。為研究該基因?qū)θ~綠素合成的控制，需要構(gòu)建該種生物缺失ch1L基因的變異株細(xì)胞。構(gòu)建過(guò)程如下：

第①步：用PCR技術(shù)從藍(lán)藻環(huán)狀DNA中擴(kuò)增出ch1L基因片段。

第②步：將ch1L基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成重組質(zhì)粒1。

第③步：將重組質(zhì)粒1中ch1L基因中部0.8kb片段刪除，用一段紅霉素抗性基因取代之，得到重組質(zhì)粒2。

第④步：將重組質(zhì)粒2導(dǎo)入藍(lán)藻細(xì)胞，由于改造后的基因與ch1L基因仍有很長(zhǎng)的序列相同，所以能準(zhǔn)確地與其發(fā)生同源重組，產(chǎn)生出缺失ch1L基因的突變株。請(qǐng)根據(jù)上述資料，回答下列問(wèn)題：

（1）第①步用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA片段時(shí)用到的耐高溫的酶通常是指什么酶？         。

PCR擴(kuò)增DNA時(shí)必須加入引物，引物的實(shí)質(zhì)是          ，其作用是                                。

（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA一般要經(jīng)過(guò)三十多次循環(huán)，每次循環(huán)都要經(jīng)過(guò)三個(gè)步驟，其中“復(fù)性”這一步驟發(fā)生的變化是                   。為消除PCR擴(kuò)增過(guò)程當(dāng)中外源DNA污染造成的影響，應(yīng)如何設(shè)置對(duì)照？                       。

（3）構(gòu)建重組質(zhì)粒1、2時(shí)，為保證成功率，往往使用                        酶

對(duì)基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割，以切出相同的黏性末端，便于連接。此酶的作用是將DNA分子的              鍵打開(kāi)。

（4）質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體，其化學(xué)本質(zhì)是         ，此外還可用噬菌體、動(dòng)植物病毒作用為運(yùn)載體。

（5）導(dǎo)入重組質(zhì)粒2以后，往往還需要進(jìn)行檢測(cè)和篩選，可用            制成探針，檢測(cè)是否導(dǎo)入了重組基因，在培養(yǎng)基中加入              可將變異株細(xì)胞篩選出來(lái)。

ch1L基因是藍(lán)藻擬核DNA上與葉綠素合成有關(guān)的基因。為研究該基因?qū)θ~綠素合成的控制，需要構(gòu)建該種生物缺失ch1L基因的變異株細(xì)胞。構(gòu)建過(guò)程如下：

第①步：用PCR技術(shù)從藍(lán)藻環(huán)狀DNA中擴(kuò)增出ch1L基因片段。

第②步：將ch1L基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成重組質(zhì)粒1。

第③步：將重組質(zhì)粒1中ch1L基因中部0.8kb片段刪除，用一段紅霉素抗性基因取代之，得到重組質(zhì)粒2。

第④步：將重組質(zhì)粒2導(dǎo)入藍(lán)藻細(xì)胞，由于改造后的基因與ch1L基因仍有很長(zhǎng)的序列相同，所以能準(zhǔn)確地與其發(fā)生同源重組，產(chǎn)生出缺失ch1L基因的突變株。請(qǐng)根據(jù)上述資料，回答下列問(wèn)題：

（1）第①步用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA片段時(shí)用到的耐高溫的酶通常是指什么酶？         。

PCR擴(kuò)增DNA時(shí)必須加入引物，引物的實(shí)質(zhì)是          ，其作用是                                。

（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA一般要經(jīng)過(guò)三十多次循環(huán)，每次循環(huán)都要經(jīng)過(guò)三個(gè)步驟，其中“復(fù)性”這一步驟發(fā)生的變化是                   。為消除PCR擴(kuò)增過(guò)程當(dāng)中外源DNA污染造成的影響，應(yīng)如何設(shè)置對(duì)照？                       。

（3）構(gòu)建重組質(zhì)粒1

2時(shí)，為保證成功率，往往使用                       酶

對(duì)基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割，以切出相同的黏性末端，便于連接。此酶的作用是將DNA分子的              鍵打開(kāi)。

（4）質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體，其化學(xué)本質(zhì)是         ，此外還可用噬菌體、動(dòng)植物病毒作用為運(yùn)載體。

（5）導(dǎo)入重組質(zhì)粒2以后，往往還需要進(jìn)行檢測(cè)和篩選，可用            制成探針，檢測(cè)是否導(dǎo)入了重組基因，在培養(yǎng)基中加入              可將變異株細(xì)胞篩選出來(lái)。

應(yīng)用基因工程技術(shù)可以獲得人們需要的生物新品種或新產(chǎn)品。請(qǐng)根據(jù)資料和圖解回答下列問(wèn)題：
材料一：蜘蛛絲（絲蛋白）被稱為“生物鋼”，有著超強(qiáng)的抗張強(qiáng)度，可制成防彈背心、降落傘繩等。蜘蛛絲還可被制成人造韌帶和人造肌腱。科學(xué)家研究出集中生產(chǎn)蜘蛛絲的方法——培育轉(zhuǎn)基因蜘蛛羊。
材料二：注射疫苗往往會(huì)在兒童和部分成年人身上引起痛苦，將疫苗藏身于水果蔬菜中，人們?cè)谑秤眠@些轉(zhuǎn)基因植物的同時(shí)也獲得免疫力，因而無(wú)需免疫接種，這一新概念將引起疫苗研究的一場(chǎng)革命。

（1）過(guò)程①⑤所需要的工具酶有                   ，構(gòu)建的乙肝表面抗原蛋白基因表達(dá)載體一般由                                  等部分組成。
（2）過(guò)程②是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入山羊受體細(xì)胞，受體細(xì)胞應(yīng)選擇          ，采用最多的也是最有效的導(dǎo)入方法是           ；
過(guò)程⑥是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入萵苣受體細(xì)胞，受體細(xì)胞可為                 ，采用最多的導(dǎo)入方法是                 。
（3）通過(guò)①～④過(guò)程培育的蜘蛛羊可以作為乳腺生物反應(yīng)器，從         中提取所需要的蜘蛛絲蛋白。還可以形成膀胱生物反應(yīng)器，從         中提取所需蛛絲蛋白，簡(jiǎn)化提取過(guò)程。
資料三：PCR技術(shù)（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù)，下圖表示合成過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖分析回答：

（4）A過(guò)程高溫使DNA變性解旋，對(duì)該過(guò)程的原理敘述正確的是:(    )