(12分 )PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)簡(jiǎn)稱,可以完成特定基因的體外復(fù)制,標(biāo)準(zhǔn)的PCR過程如下圖,一次循環(huán),DNA含量就增加一倍,下圖為一次循環(huán)
(1)PCR中使雙鏈DNA模板的形成單鏈DNA,需要加熱,相當(dāng)于在細(xì)胞內(nèi)完成此過程中 的作用。
(2)在合成互補(bǔ)子鏈過程中,一般不使用DNA聚合酶, 而使用Taq酶,請(qǐng)你根據(jù)圖解中有關(guān)信息確定最可能原因是Taq酶 。
(3)合成與模板互補(bǔ)的DNA鏈?zhǔn)且詃NTP(三磷酸脫氧核糖核苷酸)為原料,若用脫氧核糖核苷酸則不能形成互補(bǔ)的子鏈,dNTP可用簡(jiǎn)略用下圖解表示。
推測(cè):最終單個(gè)dNTP連接形成子代DNA鏈時(shí),要斷裂 個(gè)磷酸鍵,并同時(shí)為DNA鏈的形成提供 。
(4)若要用PCR技術(shù)特異性地拷貝DNA分子上“X基因”,需在PCR反應(yīng)中加入兩種引物,兩種引物及其與模板鏈的結(jié)合位置如下圖1所示。經(jīng)過一次循環(huán)后,產(chǎn)物如下圖2所示。則經(jīng) 輪循環(huán)后,產(chǎn)物中出現(xiàn)如下圖3所示DNA分子;此DNA分子共有 個(gè)。
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科目:高中生物 來源:2011-2012學(xué)年陜西省西安一中高二下學(xué)期期末考試生物試卷(帶解析) 題型:綜合題
(12分) 下圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因,ampR表示氨芐青霉素抗性基因,BamHⅠ、Hind Ⅲ、SmaⅠ直線所示為三種限制酶的酶切位點(diǎn)。
據(jù)圖回答:
(1)圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體,需用 限制酶同時(shí)酶切載體和人乳鐵蛋白基因,篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含 的培養(yǎng)基上進(jìn)行。
(2)能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是 (填字母代號(hào))。
A.啟動(dòng)子 B.tetR C.復(fù)制原點(diǎn) D.a(chǎn)mpR
(3)過程①采用的操作方法是 (填字母代號(hào))。
A.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 B.大腸桿菌轉(zhuǎn)化 C.顯微注射 D.基因槍法
(4)為檢測(cè)人乳鐵蛋白是否表達(dá)成功,可采用 (填字母代號(hào))技術(shù)。
A.核酸分子雜交 B.基因序列分析 C.抗原-抗體雜交 D.PCR
(5)基因工程的核心步驟是
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科目:高中生物 來源:2014屆甘肅秦安一中高三第一次檢測(cè)生物卷(解析版) 題型:綜合題
(共12分)下圖表示我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的具體培育過程。
請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題:
(1)上述過程涉及的現(xiàn)代生物工程技術(shù),屬于分子水平的是___________,其核心步驟是______________________ 。
(2)構(gòu)建重組DNA分子所用的限制性內(nèi)切酶作用于圖中的 處,DNA連接酶作用于 處。(填“a”或“b”),b箭頭指的的是 ,PCR過程斷裂此鍵用 。
(3)若要獲得單個(gè)的成纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),需用___________處理豬胚胎的部分組織。
(4)E過程中若要獲得大量的卵母細(xì)胞需用___________激素處理成年母豬。
(5)H過程的名稱是______ ___,所選擇的胚胎一般處于_______ 期較合適。
(6)經(jīng)過培養(yǎng)得到早期胚胎后可以用胚胎分割技術(shù)以獲得更多基因型______ (相同/不相同)的轉(zhuǎn)基因克隆豬胚胎,且在進(jìn)行H過程之前,需要對(duì)代孕母豬進(jìn)行___________處理,以給早期胚胎移入受體提供相同的生理環(huán)境。
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科目:高中生物 來源:2013屆陜西省高二下學(xué)期期末考試生物試卷(解析版) 題型:綜合題
(12分) 下圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因,ampR表示氨芐青霉素抗性基因,BamHⅠ、Hind Ⅲ、SmaⅠ直線所示為三種限制酶的酶切位點(diǎn)。
據(jù)圖回答:
(1)圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體,需用 限制酶同時(shí)酶切載體和人乳鐵蛋白基因,篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含 的培養(yǎng)基上進(jìn)行。
(2)能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是 (填字母代號(hào))。
A.啟動(dòng)子 B.tetR C.復(fù)制原點(diǎn) D.a(chǎn)mpR
(3)過程①采用的操作方法是 (填字母代號(hào))。
A.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 B.大腸桿菌轉(zhuǎn)化 C.顯微注射 D.基因槍法
(4)為檢測(cè)人乳鐵蛋白是否表達(dá)成功,可采用 (填字母代號(hào))技術(shù)。
A.核酸分子雜交 B.基因序列分析 C.抗原-抗體雜交 D.PCR
(5)基因工程的核心步驟是
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科目:高中生物 來源:2010年湖北省高一生物期末考試生物試題 題型:選擇題
(12分 )PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)簡(jiǎn)稱,可以完成特定基因的體外復(fù)制,標(biāo)準(zhǔn)的PCR過程如下圖,一次循環(huán),DNA含量就增加一倍,下圖為一次循環(huán)
(1)PCR中使雙鏈DNA模板的形成單鏈DNA,需要加熱,相當(dāng)于在細(xì)胞內(nèi)完成此過程中 的作用。
(2)在合成互補(bǔ)子鏈過程中,一般不使用DNA聚合酶, 而使用Taq酶,請(qǐng)你根據(jù)圖解中有關(guān)信息確定最可能原因是Taq酶 。
(3)合成與模板互補(bǔ)的DNA鏈?zhǔn)且詃NTP(三磷酸脫氧核糖核苷酸)為原料,若用脫氧核糖核苷酸則不能形成互補(bǔ)的子鏈,dNTP可用簡(jiǎn)略用下圖解表示。
推測(cè):最終單個(gè)dNTP連接形成子代DNA鏈時(shí),要斷裂 個(gè)磷酸鍵,并同時(shí)為DNA鏈的形成提供 。
(4)若要用PCR技術(shù)特異性地拷貝DNA分子上“X基因”,需在PCR反應(yīng)中加入兩種引物,兩種引物及其與模板鏈的結(jié)合位置如下圖1所示。經(jīng)過一次循環(huán)后,產(chǎn)物如下圖2所示。則經(jīng) 輪循環(huán)后,產(chǎn)物中出現(xiàn)如下圖3所示DNA分子;此DNA分子共有 個(gè)。
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