Question

14．單克隆抗體的特點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高、可以大量制備，已被廣泛應(yīng)用于疾病的診斷和治療．用H7N9病毒制備單克隆抗體的流程如圖所示：

（1）過(guò)程③常用的方法是顯微注射法．
（2）向小鼠體內(nèi)注射抗原蛋白，使小鼠產(chǎn)生體液免疫．從小鼠體內(nèi)分離的細(xì)胞Ⅰ是B細(xì)胞（漿細(xì)胞或已免疫B細(xì)胞），細(xì)胞Ⅱ應(yīng)具有的特點(diǎn)是既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．
（3）體外培養(yǎng)細(xì)胞Ⅱ，首先應(yīng)保證其處于的無(wú)菌、無(wú)毒環(huán)境，其次需要提供充足的營(yíng)養(yǎng)和適宜的溫度．培養(yǎng)箱充入二氧化碳的作用是維持培養(yǎng)液的pH．
（4）對(duì)于轉(zhuǎn)基因成功的細(xì)胞Ⅱ還要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和檢測(cè)（專(zhuān)一）抗體．
（5）若要預(yù)防H7N9禽流感，可用圖中的抗原蛋白作為疫苗．

Answer 1

分析 1、基因工程至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體．基因表達(dá)載體的組成包括：目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞的方法是顯微注射法．檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)．
2、單克隆抗體的制備流程：人工誘導(dǎo)經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，再經(jīng)篩選獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，通過(guò)培養(yǎng)獲得的雜交瘤細(xì)胞得到單克隆抗體．
3、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿(mǎn)足以下條件
（1）充足的營(yíng)養(yǎng)供給--微量元素、無(wú)機(jī)鹽、糖類(lèi)、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、血清等．
（2）適宜的溫度：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4．
（3）無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌處理．通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染．此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害．
（4）氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO₂．O₂是細(xì)胞代謝所必需的，CO₂的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．

解答 解：（1）③將重組DNA導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞，常用顯微注射法．
（2）向小鼠體內(nèi)注射抗原蛋白，使小鼠產(chǎn)生相應(yīng)的漿細(xì)胞，這是體液免疫，從小鼠體內(nèi)分離的細(xì)胞Ⅰ是B細(xì)胞（漿細(xì)胞或已免疫B細(xì)胞），將無(wú)限增殖的基因?qū)�入漿細(xì)胞，得到的細(xì)胞Ⅱ應(yīng)具有的特點(diǎn)是 既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體
（3）體外培養(yǎng)細(xì)胞Ⅱ，首先應(yīng)保證其處于的無(wú)菌無(wú)毒環(huán)境，其次需要提供充足的營(yíng)養(yǎng)和適宜的溫度．培養(yǎng)箱充入二氧化碳的作用是維持培養(yǎng)液的pH．
（4）對(duì)于轉(zhuǎn)基因成功的細(xì)胞Ⅱ還要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和檢測(cè)（專(zhuān)一）抗體
（5）疫苗為毒性弱的抗原，因此要預(yù)防H7N9禽流感，可以用圖中的抗原蛋白作為疫苗．
故答案為：
（1）顯微注射法
（2）體液      B細(xì)胞（漿細(xì)胞或已免疫B細(xì)胞）    既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體
（3）無(wú)菌、無(wú)毒     維持培養(yǎng)液的pH
（4）（專(zhuān)一）抗體
（5）抗原蛋白

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程和單克隆抗體的制備有關(guān)知識(shí)，意在考查考生識(shí)圖能力和理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀(guān)點(diǎn)，通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論．