Question

【題目】乳酸鏈球菌素(Nisin)是…種比較安全的生物型防腐劑，在人體的消化道內可被蛋白酶降解，并不會像抗生素那樣改變腸道正常菌群，因此應用比較廣泛。某興趣小組擬驗證Nisin對小鼠腸道菌群沒有影響，進行了以下實驗。

(1)實驗步驟：

①選取狀況良好、年齡和體重近似的小鼠20只，隨機均分為A、B兩組；

②A組小鼠用含1.0%Nisin的食物連續(xù)飼喂12周；B組小鼠用____連續(xù)飼喂12周作為對照，其他情況相同；

③搜集A、B組小鼠糞便制成懸浮液分別涂布于____上（填下列選項前的字母）；

a．全營養(yǎng)液體培養(yǎng)基
b．以Nisin為碳源的液體培養(yǎng)基

c．全營養(yǎng)固體培養(yǎng)基
d．以Nisin為碳源的固體培養(yǎng)基

④接種后置于____（填“有氧”或“無氧”）條件下培養(yǎng)，通過觀察____，以初步鑒定小鼠消化道中的微生物類群；

⑤統(tǒng)計比較兩組微生物類群的種類和數量，以驗證結論。

(2)請根據以上步驟回答下列問題：

①在制作培養(yǎng)基時要滿足微生物生長對pH的要求，調pH應在高壓蒸汽滅菌之 ____ （填“前”或“后”）。

②若菌群中含有大腸桿菌，可在培養(yǎng)基中添加____制成鑒別培養(yǎng)基，可根據培養(yǎng)基中____色菌落的數目，計算出腸道中大腸桿菌的數量。除上述計數法外，還可以利用___ 在顯微鏡下直接觀察統(tǒng)計菌體的數量。

Answer 1

【答案】 用等量不含1.0% Nisin的同種食物 c 無氧 菌落的特征（大小、顏色、形狀和隆起程度等方面） 前 伊紅美藍 黑 血細胞計數板

【解析】試題分析：探究實驗需要遵循對照原則和單一變量原則。該實驗的目的是探究乳酸鏈球菌素對小鼠腸道菌群的影響，因此可用含乳酸鏈球菌素的食物連續(xù)飼喂甲組小鼠12周（實驗組），用含有等量的經過滅菌的乳酸鏈球菌素的相同食物連續(xù)飼喂乙組小鼠12周（對照組），通過觀察菌落的特征來統(tǒng)計比較微生物的數量及比例。

（1）實驗步驟：
①選取狀況良好、年齡和體重近似的小鼠20只，隨機均分為A、B兩組；
②A組小鼠用含1.0%Nisin的食物連續(xù)飼喂12周；B組小鼠用用等量不含1.0% Nisin的同種食物連續(xù)飼喂12周作為對照，其他情況相同；

③該實驗的目的是探究Nisin對小鼠腸道菌群的影響，而不是篩選出某種微生物，因此搜集A和B組（實驗組和對照組）小鼠糞便制成懸浮液涂布于全營養(yǎng)的固體培養(yǎng)基上，故選c。
④腸道菌群生活在缺氧的環(huán)境中，因此接種后應該置于無氧條件下培養(yǎng)，通過觀察菌落的特征以初步鑒定小鼠消化道中的微生物類群。

⑤統(tǒng)計比較微生物的數量及比例，分析得出結論。
（2）①制備培養(yǎng)基的步驟為：計算、稱量、融合、調pH、滅菌和倒平板，即調pH應在高壓蒸汽滅菌之前。

②伊紅-美藍培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌，因此可在培養(yǎng)基中添加伊紅-美藍制成鑒別培養(yǎng)基，可根據培養(yǎng)基中黑色菌落的數目，計算出腸道中大腸桿菌的數量。此外還可以利用血球計數板在顯微鏡下直接觀察統(tǒng)計菌體的數量。