Question

【題目】生物柴油是一種可再生清潔能源，其應用在一定程度上能夠減緩人類對化石燃料的消耗�？茖W家發(fā)現(xiàn)，在微生物M產(chǎn)生的脂肪酶的作用下，植物油與甲醇反應能夠合成生物柴油（如下圖）。

（1）欲分離篩選出能分泌脂肪酶的細菌，應配制_____碳源的培養(yǎng)基，這種培養(yǎng)基從功能上看屬于____培養(yǎng)基。

（2）在微生物培養(yǎng)過程中，滅菌與消毒的主要區(qū)別是滅菌能夠殺死物體內(nèi)外______。常用______法對玻璃器皿進行滅菌。

（3）經(jīng)過稀釋，在平板上接入0．1mL稀釋液并涂布，經(jīng)適當時間培養(yǎng)后，在平板上計數(shù)菌落，據(jù)此可計算出每毫升培養(yǎng)液中的活菌數(shù)。這種計數(shù)方法得到的結(jié)果一般比實際值偏小，原因可能有______________________________。

（4）經(jīng)上述實驗發(fā)現(xiàn)稀釋倍數(shù)為101、102、103、104、105、106得到的結(jié)果分別為難以計數(shù)、難以計數(shù)、難以計數(shù)、159、17、2，為保證結(jié)果準確，一般選擇_____稀釋倍數(shù)的平板進行統(tǒng)計。

（5）為降低生物柴油生產(chǎn)成本，可利用__________技術使脂肪酶能夠重復使用。

Answer 1

【答案】以脂肪為唯一 選擇 所有的微生物的芽孢和孢子 干熱滅菌 有的菌落是由2個以上的細菌形成的、涂布器上還殘留少量細菌 104 固定化酶

【解析】

1、微生物的營養(yǎng)物質(zhì)主要有碳源、氮源、水和無機鹽等，篩選菌株時需要用選擇培養(yǎng)基；實驗室中篩選微生物的原理是人為提供有利于目的菌生長的條件，同時抑制或阻止其他微生物生長。

2、微生物常見的接種的方法

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

（1）欲分離篩選出能分泌脂肪酶的細菌，應配制以脂肪為唯一碳源的培養(yǎng)基；由于只要能分解脂肪的微生物能在這種培養(yǎng)基上生存，因此從功能上看，其屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）在微生物培養(yǎng)過程中，滅菌和消毒的主要區(qū)別是滅菌能夠殺死物體內(nèi)外所有的微生物的芽孢和孢子，玻璃器皿常采用的滅菌方法為干熱滅菌。

（3）采用稀釋涂布平板法得到的結(jié)果一般比實際值偏小，原因可能是有的菌落是由2個以上的細菌形成的、涂布器上還殘留少量細菌。

（4）根據(jù)題干中數(shù)據(jù)可知，稀釋倍數(shù)為104時，培養(yǎng)基中菌落能通過肉眼進行計數(shù)，且數(shù)目在30-300之間，因此為保證結(jié)果準確，一般選擇104稀釋倍數(shù)的平板進行統(tǒng)計。

（5）為降低生物柴油生產(chǎn)成本，可利用固定化酶技術使脂肪酶能夠重復使用。