Question

【題目】臨床使用抗生素前，有時需要進(jìn)行細(xì)菌的耐藥性實(shí)驗．試驗時，首先從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實(shí)驗步驟進(jìn)行操作，以確定從病人身上獲得的致病菌對不同抗生素的敏感性．

（1）取該致病菌單菌落適當(dāng)稀釋，用_____法接種于固體培養(yǎng)基表面，在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，使其均勻生長，布滿平板．

（2）為了檢測獲得的致病菌對于抗生素的敏感性，將含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片分別均勻地放置在四塊平板上，培養(yǎng)一段時間后，得到的結(jié)果為：含A抗生素的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對A抗生素_____；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明_____；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個小菌落，在排除雜菌污染的情況下，很可能此菌對D抗生素產(chǎn)生了_____。

（3）根據(jù)上述實(shí)驗結(jié)果，為達(dá)到抗菌目的，最好應(yīng)選用抗生素_____。

（4）下面的甲圖表示酵母菌、硝化細(xì)菌和乳酸菌在半固體培養(yǎng)基中的生長情況，乙圖表示這三種菌的增殖速度與氧濃度之間的關(guān)系，請據(jù)圖作答：

①乙中a、b、c三條曲線分別表示甲中_____號試管、_____試管和_____試管中微生物在不同氧氣濃度中的增殖速度。

②研究發(fā)現(xiàn)，青霉素能破壞細(xì)菌的細(xì)胞壁并在細(xì)菌細(xì)胞的繁殖期起殺菌作用．如果培養(yǎng)基中混雜了這三類微生物；設(shè)計實(shí)驗，利用改變培養(yǎng)基成分等條件，將酵母菌和硝化細(xì)菌分離出來．要分離出酵母菌的方法是培養(yǎng)基成分_____；要分離出硝化細(xì)菌的方法是培養(yǎng)基成分_____。

Answer 1

【答案】涂布 敏感 該致病菌對C的敏感性比對A弱 耐藥性 A 3 2 1 加抗生素 不加有機(jī)碳源

【解析】

（1）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細(xì)胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體--菌落。

（2）分析甲圖：1號試管中的菌體集中在培養(yǎng)液的表層，說明是好氧性硝化細(xì)菌；2號試管的菌體在培養(yǎng)液的均勻分布，說明是兼性厭氧性的酵母菌；3號試管的菌體集中在培養(yǎng)液的底層，說明是厭氧性的乳酸菌。

（1）分離菌落常用稀釋涂布平板法或劃線涂布法。取該單菌落適當(dāng)稀釋，使其“均勻生長”的方法是用涂布法接種于固體培養(yǎng)基表面，并在適宜溫度下培養(yǎng)。

（2）在抗藥性檢驗過程中，如果在菌落周圍出現(xiàn)透明的圓圈，說明此種抗生素可抑制該細(xì)菌；透明圈的大小表示著此種抗生素抗菌的強(qiáng)弱。將分別含有A、B、C三種抗生素的濾紙均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時間后，含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素A敏感；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該病菌對抗生素B不敏感；含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明該病菌對C的敏感性比對A的弱。含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的耐藥菌。

（3）根據(jù)（2）的分析，實(shí)驗結(jié)果抗生素A對該致病菌的作用最好。

（4）①乙圖中a曲線，隨著氧氣濃度增加，微生物的繁殖速度減慢，說明是乳酸菌，對應(yīng)于3號試管；b無氧時繁殖速度較慢，隨著氧氣濃度增加，微生物的繁殖速度增加，說明是酵母菌，對應(yīng)于2號試管；c氧氣濃度到一定程度，才能繁殖，說明是硝化細(xì)菌，對應(yīng)于1號試管。

②在培養(yǎng)基中加入抗生素，只有酵母菌能生長；硝化細(xì)菌為化能自養(yǎng)型的生物，可以合成有機(jī)物供自身利用，接種到不含有機(jī)碳源的培養(yǎng)基中，可分離出硝化細(xì)菌。