Question

12．生物技術(shù)實(shí)踐與生活的聯(lián)系非常緊密．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）貴州遵義仁懷茅臺(tái)酒聞名全國(guó)，其中起主要作用的微生物是酵母菌，為讓其更好的生長(zhǎng)繁殖，應(yīng)將溫度控制在18～25℃．釀酒過(guò)程中是否有酒精的產(chǎn)生，可用重鉻酸鉀來(lái)檢驗(yàn)，在酸性條件下，該物質(zhì)與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色．
（2）泡菜是喜愛(ài)羊肉粉的貴州人餐桌上不可少的腌制食品之一．制作泡菜時(shí)，泡菜壇一般用水密封，原因是乳酸菌是厭氧型細(xì)菌．泡菜中亞硝酸鹽的含量進(jìn)行檢測(cè)，在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料．
（3）手機(jī)高溫、潮濕的環(huán)境非常適合細(xì)菌的生長(zhǎng)，引起食源性疾病的大腸桿菌就是其中之一，部分高中生卻沉迷于手機(jī)不能自拔．南中某興趣小組欲了解手機(jī)上大腸桿菌的種類及分布情況，進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)．請(qǐng)完善實(shí)驗(yàn)內(nèi)容并回答相關(guān)問(wèn)題：
實(shí)驗(yàn)步驟：
①制含有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽的固體培養(yǎng)基，并在培養(yǎng)基中加人少量伊紅一美藍(lán)（使大腸桿菌菌落呈現(xiàn)特定的顏色）；
②10名學(xué)生的手機(jī)正、反面采集樣品，分別接種至滅菌的培養(yǎng)基上，在37°C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24〜48h，選取呈現(xiàn)黑色的菌落；將接種針用灼燒法滅菌后，將選取的菌落接種到固體培養(yǎng)基，在恒溫?fù)u床上培養(yǎng)24h，使細(xì)菌大量繁殖；
③用?稀釋涂布（平板）法將②過(guò)程所獲得的細(xì)菌接種到培養(yǎng)基上，分別統(tǒng)計(jì)菌落的種類和數(shù)目；④根據(jù)菌落的特征進(jìn)一步鑒定大腸桿菌的類型．

Answer 1

分析 1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型．果酒制作的原理：
（1）在有氧條件下，反應(yīng)式如下：C₆H₁₂O₆+6H₂O+6O₂$\stackrel{酶}{→}$6CO₂+12H₂O+能量；             
（2）在無(wú)氧條件下，反應(yīng)式如下：C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2CO₂+2C₂H₅OH+能量．
2、培養(yǎng)基按功能分：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分	根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學(xué)藥品	依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)	鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

3、微生物常見(jiàn)的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．

解答 解：（1）酵母菌生長(zhǎng)繁殖的適宜溫度是18～25℃．酒精可用酸性重鉻酸鉀溶液鑒定，溶液的顏色由橙色變成灰綠色．
（2）參與泡菜制作的乳酸菌屬于厭氧型細(xì)菌，因此泡菜壇一般用水密封．泡菜中亞硝酸鹽的含量進(jìn)行檢測(cè)，在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料．
（3）①培養(yǎng)基的基本成分有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽．大腸桿菌可用伊紅美藍(lán)鑒定，因此，要分離大腸桿菌應(yīng)該制含有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽的固體培養(yǎng)基，并在培養(yǎng)基中加人少量伊紅一美藍(lán)（使大腸桿菌菌落呈現(xiàn)特定的顏色）；
②接種針用灼燒滅菌法進(jìn)行滅菌；
③接種微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中稀釋涂布平板法可用于微生物的計(jì)數(shù)．因此，用 稀釋涂布（平板）法將②過(guò)程所獲得的細(xì)菌接種到培養(yǎng)基上，分別統(tǒng)計(jì)菌落的種類和數(shù)目．
故答案為：
（1）18～25℃灰綠色
（2）乳酸菌是厭氧型細(xì)菌  對(duì)氨基苯磺酸
（3）①碳源、氮源      伊紅一美藍(lán)    ②灼燒?稀釋涂布（平板）

點(diǎn)評(píng) 本題考查果酒和果醋的制作、微生物的分離和培養(yǎng)、泡菜的制作等，對(duì)于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)采用的方法、實(shí)驗(yàn)操作步驟等，需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過(guò)程中注意積累．