Question

14．生活飲用水已經(jīng)過沉淀、過濾、加氯消毒等處理，含微生物很少，但當其水源水不潔或處理達不到要求時，仍然會含相當量的微生物甚至含有致病性微生物；供水管道破損及二次供水等環(huán)節(jié)也可能導致生活飲用水的污染．因此生活飲用水的微生物安全性日常檢測是很重要的．我國生活飲用水水質(zhì)標準（GB5749-85）中規(guī)定生活飲用水中細菌總數(shù)不得大于100個/mL，總大腸菌群不得大于3個/L．
（1）檢驗大腸桿菌的含量時，通常將水樣進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量，這種方法稱為稀釋涂布平板法．如果在培養(yǎng)基中出現(xiàn)了單個菌落，產(chǎn)生每個菌落的最初細胞數(shù)目是1個．
（2）用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時是否需要設置對照組？需要
為什么？因為需要判斷培養(yǎng)基是否被污染．
（3）純化大腸桿菌時使用的培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌，關鍵的步驟是接種，純化培養(yǎng)方法除（1）中的外還有平板劃線法．
（4）如果要測定水中的病毒種類，可以用PCR技術(shù)使其遺傳物質(zhì)擴增，PCR技術(shù)的原理是DNA雙鏈復制，該過程使用的酶為Taq酶（耐高溫的DNA聚合酶）．

Answer 1

分析 稀釋平板計數(shù)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個菌落，即是由一個單細胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征設計的計數(shù)方法，即一個菌落代表一個單細胞．
計數(shù)時，首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在（否則一個菌落就不只是代表一個細胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)．經(jīng)培養(yǎng)后，由單個細胞生長繁殖形成菌落，統(tǒng)計菌落數(shù)目，即可計算出樣品中的含菌數(shù)．此法所計算的菌數(shù)是培養(yǎng)基上長出來的菌落數(shù)，故又稱活菌計數(shù)．

解答 解：（1）對微生物的分離常用稀釋涂布平板法和平板劃線法進行接種，但稀釋涂布平板法適用于微生物的計數(shù)．如果在培養(yǎng)基中出現(xiàn)了單個菌落，產(chǎn)生每個菌落的最初細胞是一個．
（2）由于需要判斷培養(yǎng)基是否被污染，所以用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時需要設置對照組．
（3）純化大腸桿菌時使用的培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌，不可用加入抗生素的方法防止雜菌感染．關鍵的步驟是 接種，純化培養(yǎng)方法稀釋涂布平板法外，還有 平板劃線法．
（4）PCR技術(shù)的原理是運用了DNA復制的原理，該過程中需要使用耐高溫的DNA聚合酶．
故答案為：
（1）稀釋涂布平板法    1 
（2）需要   因為需要判斷培養(yǎng)基是否被污染
（3）高壓蒸汽滅菌       接種     平板劃線法
（4）DNA雙鏈復制     Taq酶（耐高溫的DNA聚合酶）

點評 本題旨在考查微生物的分離和培養(yǎng)、某種微生物數(shù)量的測定和培養(yǎng)基對微生物的選擇利用，意在考查具備驗證簡單生物學事實的能力，并能對實驗現(xiàn)象和結(jié)果進行解釋、分析和處理，具有對一些生物學問題進行初步探究的能力．