Question

20．預(yù)防乙肝最有效的途徑是接種疫苗．將乙肝表面抗原基因轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞內(nèi)可生產(chǎn)乙肝疫苗．回答下列問(wèn)題．
（1）欲在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增乙肝表面抗原基因．通過(guò)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（填寫中文名稱）技術(shù)，其原理是DNA雙鏈復(fù)制，利用該技術(shù)擴(kuò)增乙肝表面抗原基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列．
（2）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，此外采用花粉管通道法十分簡(jiǎn)便經(jīng)濟(jì)．用抗原--抗體雜交技術(shù)檢測(cè)植物細(xì)胞是否成功合成乙肝表面抗原蛋白，若有雜交帶出現(xiàn)，表明目的基因已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品．
（3）將乙肝表面抗原基因?qū)�入植物�?xì)胞后，采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得愈傷組織，該技術(shù)需在無(wú)菌和人工控制條件下進(jìn)行．
（4）乙肝疫苗在2～8℃條件下保存，其不宜在常溫下保存最可能的原因乙肝疫苗的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，在常溫下保存易變性失活．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）PCR技術(shù)（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）可在段時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因，其原理是DNA雙鏈復(fù)制；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列．
（2）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，此外還有花粉管通道法和基因槍法，其中花粉管通道法十分簡(jiǎn)便經(jīng)濟(jì)．用抗原--抗體雜交技術(shù)檢測(cè)植物細(xì)胞是否成功合成乙肝表面抗原蛋白，若有雜交帶出現(xiàn)，表明目的基因已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品．
（3）將轉(zhuǎn)基因細(xì)胞培育常轉(zhuǎn)基因植株需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該技術(shù)需在 無(wú)菌和人工控制條件下進(jìn)行．
（4）乙肝疫苗的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，在常溫下保存易變性失活，因此乙肝疫苗在2～8℃條件下保存，不宜在常溫下保存．
故答案為：
（1）多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)    DNA雙鏈復(fù)制     要有一段已知目的基因的核苷酸序列
（2）花粉管通道      雜交帶
（3）植物組織培養(yǎng)        無(wú)菌和人工控制
（4）乙肝疫苗的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，在常溫下保存易變性失活

點(diǎn)評(píng) 本題考查了基因工程的有關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．