【題目】P450是石油降解的關(guān)鍵酶，用SalI和NdeI聯(lián)合酶切獲得的P450基因，與圖甲所示的質(zhì)粒(pCom8)重組，導(dǎo)入土著菌種Y9，獲得了基因工程菌P450/Y9.圖中mel是黑色素合成基因，其表達(dá)能使白色的菌落變成黑色，aacCl 是慶大霉素(一種抗生素)抗性基因，限制酶NdeI. XhoI和SspI在原質(zhì)粒上均只有一個酶切位點(diǎn)，數(shù)字表示酶切位點(diǎn)間的堿基對數(shù)。圖乙表示幾種限制酶的識別序列和切割位點(diǎn),請回答下列有關(guān)問題:

(1)基因表達(dá)載體除了含有圖甲所示的條件外，還應(yīng)該含有__________、___________。

(2) Sall切割目的基因形成的黏性末端是__________.構(gòu)建pCom8重組質(zhì)粒時，需用_______(限制酶)對圖示質(zhì)粒進(jìn)行處理，才能與P450基因在___________的作用下形成重組質(zhì)粒。

(3)經(jīng)測定原質(zhì)粒為7.6kb (Ikb 為1000個堿基對)，重組質(zhì)粒經(jīng)Nde|、Ssp I聯(lián)合酶切后獲得了6.0kb和1.2kb的兩個片段，則目的基因的長度為_____kb.

(4)為了擴(kuò)增重組質(zhì)粒，需將其轉(zhuǎn)入用____________預(yù)先處理的土著菌種 Y9中，提高質(zhì)粒導(dǎo)入率, .以便獲得更多基因工程菌P450/Y9.為了篩選出轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的基因工程菌P450/Y9,應(yīng)在篩選平板培養(yǎng)基中添加___________，選擇顏色為___________的菌落擴(kuò) 大培養(yǎng)，進(jìn)而篩選出所需的工程菌.

(5)為檢測基因工程菌降解石油的能力，科研人員做了如下4組實(shí)驗(yàn)，測定不同時間各組的石油降解率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見下圖。據(jù)圖分析以下說法正確的有___________。

A.單獨(dú)使用P450/Y9對石油的降解能力比單獨(dú)使用Y9略強(qiáng)

B.作用時間越長，P450/Y9 對石油降解的能力越強(qiáng)

C.聯(lián)合使用時，P450/Y9 能顯著增加四種菌的整體降解石油的能力

D.為達(dá)到更好的效果，最好單獨(dú)使用基因工程菌P450/Y9

【答案】目的基因 復(fù)制原點(diǎn)、啟動子、終止子 —AGCT NdeⅠ、XhoⅠ DNA連接酶 1.4 Ca2＋（或CaCl2） 慶大霉素 白色 AC

【解析】

基因工程是狹義的遺傳工程，基因工程的基本原理是讓人們感興趣的基因（即目的基因）在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定高效地表達(dá)。為了實(shí)現(xiàn)基因工程的目標(biāo)，通常要有多種工具酶、目的基因、載體和宿主細(xì)胞等基本要素，并按照一定的程序進(jìn)行操作，它包括目的基因的獲得、重組DNA的形成，重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞也稱（宿主）細(xì)胞、篩選含有目的基因的受體細(xì)胞和目的基因的表達(dá)等幾個方面�；虮磉_(dá)載體的構(gòu)建（即目的基因與運(yùn)載體結(jié)合）是實(shí)施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。

(1)基因表達(dá)載體除了含有圖甲所示的條件（酶切位點(diǎn)、標(biāo)記基因）外，還應(yīng)該含有目的基因、復(fù)制原點(diǎn)、啟動子、終止子。
(2) Sall的酶切位點(diǎn)為-G↓TCGAC-，切割目的基因形成的黏性末端是—AGCT。用SalI和NdeI聯(lián)合酶切獲得的P450基因，因此構(gòu)建pCom8重組質(zhì)粒時，需用NdeⅠ、XhoⅠ（XhoⅠ和SalI切割后有相同的粘性末端）對圖示質(zhì)粒進(jìn)行處理，才能與P450基因在DNA連接酶的作用下形成重組質(zhì)粒。
(3)經(jīng)測定原質(zhì)粒為7.6kb (Ikb 為1000個堿基對)，重組質(zhì)粒經(jīng)Nde|、Ssp I聯(lián)合酶切后獲得了6.0kb和1.2kb的兩個片段，則目的基因的長度為6.0+1.2-（7.6-1.8）=1.4kb。
(4)用Ca2＋預(yù)先處理的土著菌種 Y9中，使其處于感受態(tài)，提高質(zhì)粒導(dǎo)入率，以便獲得更多基因工程菌P450/Y9。重組質(zhì)粒上有慶大霉素抗性基因aacCl ，為了篩選出轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的基因工程菌P450/Y9，應(yīng)在篩選平板培養(yǎng)基中添加慶大霉素，選擇顏色為白色的菌落擴(kuò) 大培養(yǎng)，進(jìn)而篩選出所需的工程菌。
(5)A、比較B組和C組，可知單獨(dú)使用P450/Y9對石油的降解能力比單獨(dú)使用Y9略強(qiáng)，A正確；
B、作用時間越長，P450/Y9 對石油降解的能力越弱（斜率下降），B錯誤；
C、D組降解效果優(yōu)于C組，因此聯(lián)合使用時，P450/Y9 能顯著增加四種菌的整體降解石油的能力，C正確；
D、為達(dá)到更好的效果，最好聯(lián)合使用D組四種菌株，D錯誤。
故選AC。

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】硒是一種化學(xué)元素，可用作光敏材料、電解錳行業(yè)催化劑動物體必需的營養(yǎng)元素和植物有益的營養(yǎng)元素等。硒在地殼中的含量很低，通常極難形成工業(yè)富集。亞硒酸鈉對細(xì)菌的生長有明顯的毒害作用，土壤中的一些富硒細(xì)菌可將其還原為紅色單質(zhì)硒，除工業(yè)上生產(chǎn)硒的方法之外，利用這種方法也可以得到少量的硒及分解亞硒酸鈉的細(xì)菌。如圖為土壤中富硒細(xì)菌的篩選和純化過程。請回答下列問題。

（1）應(yīng)選擇____________的土壤樣品接種到含亞硒酸鈉的液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，若②中出現(xiàn)____________的現(xiàn)象，則說明培養(yǎng)基中的亞硒酸鈉被細(xì)菌還原。

（2）④采用的接種方法為____________法，使用該方法能得到單一菌落的原理是___________。

（3）固定化富硒菌一般采用____________法，不采用另外兩種方法的原因是____________。

（4）研究人員篩選出一種具有較強(qiáng)富硒能力的菌株，現(xiàn)欲通過觀察菌落來判斷菌株對亞硒酸鈉的耐受值，請將下列實(shí)驗(yàn)補(bǔ)充完整；

①配制系列濃度梯度的亞硒酸鈉____________（填“液體”或“固體”）培養(yǎng)基；

②向培養(yǎng)基中分別接種____________的該菌株菌液，在適宜條件下培養(yǎng)一段時間；

③觀察菌落生長情況，____________的培養(yǎng)基對應(yīng)的最高亞硒酸鈉濃度即為該菌株的最高耐受值。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】回答下列（一）、（二）小題：

（一）某同學(xué)以葡萄為原料，利用下圖所示裝置制作葡萄酒。請回答：

（1）原料處理：挑選的成熟紫葡萄用高錳酸鉀溶液消毒后，需___________后打漿。挑選葡萄時需去除青果（未成熟）和爛果，其中除去青果的原因除了青果會影響葡萄酒口味外，還因?yàn)榍喙?/span>___________。

（2）制備酵母懸液：將適量干酵母加入溫水中，為使酵母迅速發(fā)生作用，可加一小撮___________，混勻，待酵母懸液產(chǎn)生氣泡后即可。氣泡中的成分是酵母菌___________產(chǎn)生的CO2。

（3）裝料：將葡萄勻漿放入上圖發(fā)酵瓶，并加入酵母懸液，攪拌均勻發(fā)酵瓶連接的彎曲玻璃管需加入適量的水，其作用除了防止發(fā)酵液被外界微生物污染外，還具有___________的作用。

（4）發(fā)酵：將發(fā)酵瓶置于溫度等條件適宜的環(huán)境中，待發(fā)酵瓶中___________，即表示發(fā)酵完畢。發(fā)酵結(jié)束的原因可能是___________（答出2點(diǎn)即可）引起酵母菌的死亡。

（5）影響葡萄酒風(fēng)味的主要因素，除了葡萄品種、溫度等環(huán)境因素外，還有___________。

（二）1972年，Carlson通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得粉藍(lán)煙草和郎氏煙草的雜種植株。過程簡圖如下所示，其中①～④表示過程。請回答：

（1）①過程為酶解去壁，需向反應(yīng)體系中加入的酶是___________，并用甘露醇將反應(yīng)體系的滲透壓調(diào)到___________水平。植物細(xì)胞在這樣的反應(yīng)體系中處理，將獲得球形的原生質(zhì)體。在去壁前需對粉藍(lán)煙草組織和朗氏煙草組織進(jìn)行___________處理。

（2）圖中所示這種借助細(xì)胞雜交的方法，將不同來源的基因結(jié)合到一起，再對雜種細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，獲得具有特定性狀的新植株的技術(shù)屬于___________技術(shù)。

（3）獲得再生植株的途徑很多。由于腋芽中存在分生組織，故也可采用帶腋芽莖段不通過___________階段而直接培養(yǎng)成叢狀苗，再誘導(dǎo)生根獲得再生植株。優(yōu)良品種的快速繁殖通常采用此方法，原因是___________。

（4）當(dāng)前多地過度開發(fā)旅游資源造成生態(tài)環(huán)境的破壞，為減緩生態(tài)環(huán)境的破壞，保護(hù)自然旅游資源，通過生態(tài)旅游工程對旅游設(shè)施進(jìn)行___________處理，能獲得較佳的經(jīng)濟(jì)效益、社會效益和生態(tài)效應(yīng)。另外當(dāng)前全國興起新農(nóng)村建設(shè)，提高農(nóng)民的生活水平，只有促進(jìn)___________的協(xié)調(diào)發(fā)展，才能促進(jìn)農(nóng)村經(jīng)濟(jì)和生態(tài)的發(fā)展。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】下圖表示精子入卵后，發(fā)生一系列變化形成受精卵的過程，下列敘述錯誤的是（ ）

A.圖中x指卵細(xì)胞膜反應(yīng)，第一道屏障是透明帶反應(yīng)

B.圖中Y指卵子的減數(shù)第二次分裂，該過程只形成了雌原核

C.精子入卵主要指精子的頭部外膜與卵細(xì)胞膜融合

D.精子入卵后精子的尾部留在外面，最后被分解吸收

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】小麥的穗發(fā)芽影響其產(chǎn)量和品質(zhì)。某地引種的紅粒小麥的穗發(fā)芽率明顯低于當(dāng)?shù)匕琢Ｐ←�。為探究淀粉酶活性與穗發(fā)芽率的關(guān)系，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn):

(1)取穗發(fā)芽時間相同、質(zhì)量相等的紅、白粒小麥種子，分別加蒸餾水研磨，制成提取液(去淀粉)，并在適宜條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)分組、步驟及結(jié)果如下:

紅粒管

白粒管

對照管

①

加樣

0.5 mL提取液

0.5 mL提取液

C

②

加緩沖液(mL)

1

1

1

③

加淀粉溶液(mL)

1

1

1

370C保溫適當(dāng)時間，終止酶促反應(yīng)，冷卻至常溫，加適量碘液顯色

顯色結(jié)果

+++

+

+++++

注:“十”數(shù)目越多表示藍(lán)色越深。

步驟①中加入的C是__________, 步驟②中加緩沖液的目的是__________。顯色結(jié)果表明:淀粉酶活性較低的品種是__________; 據(jù)此推測:淀粉酶活性越低，穗發(fā)芽率越_________。若步驟③中的淀粉溶液濃度適當(dāng)減小，為保持顯色結(jié)果不變，則保溫時間應(yīng)__________。

(2)小麥淀粉酶包括a-淀粉酶和β淀粉酶，為進(jìn)一步探究其活性在穗發(fā)芽率差異中的作用，設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)方案:

x處理的作用是使__________。 若I中兩管顯色結(jié)果無明顯差異，且II中的顯色結(jié)果為紅粒管顏色顯著深于白粒管，則表明______活性是引起這兩種小麥穗發(fā)芽率差異的主要原因。

(3)某同學(xué)用淀粉酶探究pH (用HCl和NaOH調(diào)節(jié))對酶活性的影響(已知HCI能催化淀粉水解，其他無關(guān)變量相同且適宜)，得到如圖所示的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。下列實(shí)驗(yàn)分析正確的有_____。


A.本實(shí)驗(yàn)以1h后淀粉剩余量作為檢測因變量的指標(biāo)

B.pH為3和pH為9時淀粉酶的活性相同

C.欲測出pH=5時淀粉酶催化淀粉水解的量，還需設(shè)置相同pH但不加淀粉酶的對組

D.對比pH為1和pH為7時兩組實(shí)驗(yàn)結(jié)果,說明淀粉酶降低化學(xué)反應(yīng)活化能的作用更顯著

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】如圖所示甲為突觸結(jié)構(gòu)模式圖，乙為反射弧模式圖，下列關(guān)于甲、乙兩圖的說法正確的是（　�。�

A.甲中神經(jīng)沖動從A傳至B，要發(fā)生電信號→化學(xué)信號→電信號的轉(zhuǎn)變

B.甲中3的形成與高爾基體有關(guān)，3中的內(nèi)容物釋放至5中主要借助生物膜的選擇透過性

C.甲圖所示的結(jié)構(gòu)在乙圖中僅有一處

D.若切斷乙圖中的c點(diǎn)，則刺激b點(diǎn)后a點(diǎn)不會興奮，d點(diǎn)會興奮

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】圖1為某草原生態(tài)系統(tǒng)的部分碳循環(huán)示意圖，甲～丁為生態(tài)系統(tǒng)的組成成分；圖2為該生態(tài)系統(tǒng)的部分能量流動示意圖（不考慮未利用的能量）。據(jù)圖分析回答：

（1）圖1中，碳元素進(jìn)入無機(jī)環(huán)境的途徑是______（填序號），能量進(jìn)入群落的主要途徑是______（填序號）。

（2）生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)包括_________和_________。圖2中B表示_________________。若鼠攝入能量為2.2×109kJ，A中能量為1.6×109kJ，B中能量為1.2×109kJ，狼同化能量為2.4×108kJ，則該生態(tài)系統(tǒng)中鼠到狼的能量傳遞效率為______。

（3）狼能夠依據(jù)鼠留下的氣味去捕食，鼠同樣也能夠依據(jù)狼的氣味或行為躲避獵捕，狼和鼠種群數(shù)量保持相對穩(wěn)定的調(diào)節(jié)機(jī)制屬于______調(diào)節(jié)，這也體現(xiàn)出信息傳遞能夠調(diào)節(jié)生物的___________，以維持生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定。

（4）生態(tài)系統(tǒng)的能量流動和物質(zhì)循環(huán)是同時進(jìn)行的：物質(zhì)作為能量的載體，使能量沿著________流動；能量作為動力，使物質(zhì)能夠不斷地在生物群落和無機(jī)環(huán)境之間循環(huán)往返。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】某實(shí)驗(yàn)室做了如圖所示的實(shí)驗(yàn)研究．下列相關(guān)敘述中正確的是（ ）

A. 與纖維母細(xì)胞相比，過程①形成的誘導(dǎo)干細(xì)胞的全能性較低

B. 單克隆抗體不需細(xì)胞膜上載體蛋白的協(xié)助就能釋放到細(xì)胞外

C. 每個Y細(xì)胞只產(chǎn)生一種抗體，故過程④不需進(jìn)行篩選

D. 過程②是誘導(dǎo)干細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】如圖為某生態(tài)農(nóng)場的部分物質(zhì)循環(huán)示意圖。下列有關(guān)說法正確的是（ ）

A.該生態(tài)農(nóng)場的食物鏈為：農(nóng)作物→雞→豬

B.豬和人的糞便提供給農(nóng)作物實(shí)現(xiàn)了能量多級利用

C.圖中雞、豬、人處于同一營養(yǎng)級

D.農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)需要不斷得到來自系統(tǒng)外的能量補(bǔ)充

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