Question

【題目】綠色熒光是由綠色熒光蛋白發(fā)出的,為培育能發(fā)出綠色熒光的小鼠,人們設(shè)計了如下的流程：

（1）獲取綠色熒光蛋白基因的常用方法有從基因文庫中獲取和_____________________等。

（2）綠色熒光基因通�？梢詮幕�因文庫中獲取,含有一種生物一部分基因的文庫稱為_______________________。

（3）A過程是基因工程的核心,常用到的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶和_______________________, 它們作用的化學鍵是_____________________。一個基因表達載體的組成，除了目的基因和復(fù)制原點外，還必需有__________________,__________________以及標記基因。

（4）B過程常用的方法是______________________。

（5）通常采用_________________________技術(shù)檢測外源基因是否插入了小鼠的基因組

Answer 1

【答案】人工合成cDNA文庫（部分基因文庫）DNA連接酶磷酸二酯鍵啟動子終止子顯微注射技術(shù)DNA分子雜交技術(shù)

【解析】

分析題圖：圖表示培育綠色熒光小鼠的基本流程，其中A表示基因表達載體的構(gòu)建過程，B表示將目的基因?qū)�入受體細胞，C表示早期胚胎培養(yǎng)，D表示胚胎移植，E表示妊娠。

（1）獲取目的基因——綠色熒光蛋白基因的方法有從基因文庫中獲取和人工通過化學方法合成等。

（2）基因文庫分為基因組文庫和部分基因文庫，其中含有一種生物所有基因的文庫稱為基因組文庫，含有一種生物的部分基因的文庫稱為部分基因文庫，如cDNA文庫。

（3）A過程表示基因表達載體的構(gòu)建，是基因工程的核心，常用到的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，它們作用的化學鍵是磷酸二酯鍵。基因表達載體的組成包括目的基因+啟動子+終止子+標記基因，所以用于培育綠色熒光小鼠的基因表達載體的組成必須有啟動子、終止子、目的基因和標記基因等部分。

（4）將目的基因?qū)�入動物細胞采用最多也最有效的方法是顯微注射技術(shù)。

（5）檢測外源基因是否插入了小鼠的基因組，通常采用DNA分子雜交技術(shù)，即用外源基因制作成的DNA探針與受體細胞的基因組進行雜交，觀察是否出現(xiàn)雜交帶。