Question

【題目】回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞工程的問(wèn)題：

（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要充足的營(yíng)養(yǎng)、適宜的溫度和pH 、______________的環(huán)境和一定的氣體環(huán)境等條件。當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的________________。此時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是_______。要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái)，可用_____________處理。

（2）克隆動(dòng)物的培育體現(xiàn)了 ________________的全能性，使用的供體細(xì)胞一般都是傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，以保持細(xì)胞 __________________。

（3）單克隆抗體制備過(guò)程中，B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合常用___________作為動(dòng)物特有的誘導(dǎo)因素。對(duì)經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞，還需進(jìn)行_______________，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。

Answer 1

【答案】無(wú)菌、無(wú)毒 接觸抑制 單層 胰蛋白酶 動(dòng)物體細(xì)胞核 正常的二倍體核型 滅活的病毒 克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)

【解析】

1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件①無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。②營(yíng)養(yǎng)：合成培養(yǎng)基成分：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。通常需加入血清、血漿等天然成分。③溫度：適宜溫度：哺乳動(dòng)物多是36.5℃+0.5℃；pH：7.2~7.4。④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。
2、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要充足的營(yíng)養(yǎng)、適宜的溫度和pH、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境和一定的氣體環(huán)境等條件。當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為接觸抑制。此時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是單層。要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái)，可用胰蛋白酶處理。
（2）克隆動(dòng)物的培育主要采用了核移植技術(shù)，這體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞核的全能性；由于傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞能保持正常的二倍體核型，因此使用的供體細(xì)胞一般都是傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞。
（3）單克隆抗體制備過(guò)程中，B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合常用滅活的病毒作為誘導(dǎo)因素。經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞，還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量雜交瘤細(xì)胞，既能分泌特異性抗體，又能無(wú)限繁殖。