Question

(12 分)世界苦蕎在中國，中國苦蕎在涼山。 苦蕎富含黃酮類化合物等營養(yǎng)物質(zhì)，在降血糖、降血脂等方面功效顯著。查爾酮合成酶（CHS）是黃酮類化合物合成的關(guān)鍵酶，下圖為將修飾后的 CHS基因?qū)�入苦蕎，培育高產(chǎn)黃酮苦蕎品系示意圖。

（1）過程①中能切開質(zhì)粒的酶是__________。它能在質(zhì)粒特定的部位切割的原因是____________________。

（2）圖中常用的是__________培養(yǎng)基。接種前，用滅菌后未接種的培養(yǎng)基培養(yǎng)一段時間，觀察是否形成菌落，目的是__________________________________________________。

（3）過程②、③分別是__________和__________�？嗍w體細(xì)胞能培養(yǎng)成植株的根本原因是___________________。

（4）為探究激素對于過程誘導(dǎo)愈傷組織的影響，某研究小組在培養(yǎng)基中加入6-BA和2,4─D，滅

菌后分別接種，在適宜條件下培養(yǎng)一段時間后，統(tǒng)計愈傷組織的誘導(dǎo)率，實(shí)驗結(jié)果如下表：

該實(shí)驗的因變量是____________，誘導(dǎo)的最佳組合是_____________________________________。

（5）判斷轉(zhuǎn)基因苦蕎培育是否成功，可比較轉(zhuǎn)基因苦蕎與普通苦蕎的________________含量，也可測定細(xì)胞中CHS含量。用凝膠色譜法分離CHS時，CHS最先從色譜柱中洗脫出來，說明CHS相對分子質(zhì)量較______________。

Answer 1

(12分，除標(biāo)注外每空1分)

（1）限制性核酸內(nèi)切酶 能識別特定的核苷酸序列并在特定的切點(diǎn)上切割 DNA 分子 (2 分)

（2）MS 判斷培養(yǎng)基滅菌是否徹底

（3）脫(去)分化 再分化 植物細(xì)胞的全能性其細(xì)胞中含有發(fā)育成完整個體所必需的全部基因

（4）誘導(dǎo)率 0.1mgL -1 6-BA 和 4mgL-12,4-D

（5）黃酮類化合物 大

【解析】

試題分析：（1）質(zhì)粒是環(huán)狀的DNA，能將質(zhì)粒切開的應(yīng)是限制性核酸內(nèi)切酶。它能在質(zhì)粒特定的部位切割的是因為其能在識別特定的核苷酸序列并在特定的切點(diǎn)上切割 DNA 分子。

（2）植物培養(yǎng)基通常是MS固體培養(yǎng)基。接種前，用滅菌后未接種的培養(yǎng)基培養(yǎng)一段時間，觀察是否形成菌落，目的是判斷培養(yǎng)基滅菌是否徹底。如果有菌落形成說明滅菌不徹底。

（3）過程②是形成愈傷組織的脫分化，③由愈傷組織培養(yǎng)成幼苗的再分化過程。體細(xì)胞能培養(yǎng)成完整植株的根本原因是植物細(xì)胞的全能性，其細(xì)胞中含有發(fā)育成完整個體所必需的全部基因。

（4）由表可知該實(shí)驗的自變量是濃度和激素種類，因變量是誘導(dǎo)率。最高的誘導(dǎo)率組合是最佳的誘導(dǎo)組合應(yīng)是0.1mgL -1 6-BA 和 4mgL-12,4-D。

（5）高產(chǎn)的轉(zhuǎn)基因苦蕎培育成功后黃酮類化合物含量較高，故應(yīng)比較轉(zhuǎn)基因苦蕎與普通苦蕎的黃酮類化合物含量。因為查爾酮合成酶（CHS）是黃酮類化合物合成的關(guān)鍵酶，所以也可以測定查爾酮合成酶的含量。凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時，最先洗脫出來的是分子質(zhì)量大的，說明CHS相對分子質(zhì)量較大。

考點(diǎn)：本題考查植物組織培養(yǎng)相關(guān)知識，意在考察考生對知識點(diǎn)的識記理解掌握程度和對數(shù)據(jù)分析能力。