Question

[生物一選修l生物技術(shù)實(shí)踐】
請回答下列生物技術(shù)有關(guān)問題：
（1）DNA變性后，當(dāng)溫度緩慢降低后，兩條彼此分離的DNA鏈又重新結(jié)合成雙鏈，稱為，PCR技術(shù)利用了DNA的

 

原理，通過控制溫度來控制雙鏈的解聚與結(jié)合．
（2）在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、

 

和

 

等條件，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過

 

處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散．
（3）在制備固定化酵母細(xì)胞過程中，溶化好的海藻酸鈉溶液要冷卻至室溫，才能加入已活化的酵母菌，目的是防止

 

．如果在CaCI2溶液中形成的凝膠珠顏色過淺，說明固定的酵母細(xì)胞數(shù)目

 

．
（4）若用花藥進(jìn)行離體培養(yǎng)則應(yīng)選擇花粉發(fā)育至

 

期的花藥培養(yǎng)成功率最高．

Answer 1

考點(diǎn)：用DNA片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增,微生物的分離和培養(yǎng)

專題：

分析：第（1）小題著重識記PCR技術(shù)的過程，即：高溫變性（解鏈）→低溫復(fù)性→中溫延伸．第（2）小題要求考生識記微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件，此小題較簡單．第（3）小題，蛋白質(zhì)和DNA分子在高溫下均可變性，因此為防止高溫殺死酵母菌，海藻酸鈉溶液要冷卻至室溫．最適合花藥培養(yǎng)的小孢子發(fā)育時期為單核靠邊期．

解答： 解：（1）在PCR技術(shù)的過程中包括：高溫變性（解鏈）→低溫復(fù)性→中溫延伸三個步驟，因此當(dāng)溫度緩慢降低后，兩條彼此分離的DNA鏈又重新結(jié)合成雙鏈，稱為復(fù)性．由此看出PCR技術(shù)利用了DNA在高溫下變性的原理，通過控制溫度來控制雙鏈的解聚與結(jié)合．
（2）在微生物培養(yǎng)時，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮pH、溫度和滲透壓等條件，并且還要保持無雜菌環(huán)境．為了防止大腸桿菌對環(huán)境的污染，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄．
（3）溶化好的海藻酸鈉溶液溶液溫度較高，為了防止高溫殺死酵母菌，需將海藻酸鈉溶液要冷卻至室溫，才能加入已活化的酵母菌．如果在CaCI2溶液中形成的凝膠珠顏色過淺，說明固定的酵母細(xì)胞數(shù)目較少．
（4）一般來說，在單核期，細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時期，花藥培養(yǎng)的成功率最高．而選擇單核期以前的花藥接種，質(zhì)地幼嫩，極易破碎；選擇單核期之后的花藥接種，花瓣已有松動，又給材料的消毒帶來困難，且難以挑選到單核期的花藥．
故答案為：
（l）復(fù)性  熱變性  
（2）酸堿度    滲透壓    滅菌 
（3）高溫殺死酵母菌     較少   
（4）單核

點(diǎn)評：本題考查了PCR技術(shù)、微生物的培養(yǎng)、酵母細(xì)胞的固定化、花藥離體培養(yǎng)等方面的知識，意在考查考生識記并理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力．