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（8分）菊天牛是菊花的主要害蟲之一�？蒲腥藛T將抗蟲基兇轉(zhuǎn)入菊花，培育出抗蟲菊花。下圖是獲得轉(zhuǎn)基因菊花的技術(shù)流程。請據(jù)圖回答：

（注：卡那霉素抗性基因（Kan^R為標記基因，菊花葉片對卡那霉素高度敏感）

(l)質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體，其化學本質(zhì)是，此外還可用噬菌體、動植物病毒作用為載體。

(2)下圖限制酶M和N切割產(chǎn)生的黏性末端是，連接它們所需要的基本工具是。

(3)為了促進土壤農(nóng)桿菌吸收重組質(zhì)粒，可用處理；使其處于感受態(tài)。

(4)將愈傷組織轉(zhuǎn)移到添加一定濃度植物激素、營養(yǎng)物質(zhì)以及的固體培養(yǎng)基中，在適宜條件下進行培養(yǎng)，篩選轉(zhuǎn)基因菊花。

(5)用PCR方法檢測轉(zhuǎn)基因菊花是否含有目的基因時，需根據(jù)抗蟲基因（目的基因）兩端的部分堿基序列設(shè)計特異引物，若其中一種引物共用了31個，則目的基因最多擴增了次。

(6)將轉(zhuǎn)基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料以適當比例混合后飼喂菊天牛2齡幼蟲，實驗結(jié)果如下表所示。請據(jù)表回答：

①對照組應飼喂等量的。

②據(jù)表分析，差異顯著，說明轉(zhuǎn)基因菊花對菊天牛2齡幼蟲有較強的毒殺作用。

【答案】

(1)小型環(huán)狀DNA

(2)GATC (CTAG) DNA連接酶 (3)Ca2+（或“CaCl2"）

(4)卡那霉素 (5)5

(6)①非轉(zhuǎn)基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料混合物 ②實驗組與對照組死亡率

【解析】

試題分析：（1）質(zhì)粒是一類存在于細菌和真菌細胞中獨立于DNA而自主復制的共價、閉合、環(huán)狀DNA分子。（2）當一種限制性內(nèi)切酶在一個特異性的堿基序列處切斷DNA時，就可在切口處留下幾個未配對的核苷酸片段，即5’突出。這些片斷可以通過重疊的5‘末端形成的氫鍵相連，或者通過分子內(nèi)反應環(huán)化。因此稱這些片段具有粘性，叫做粘性末端。限制酶M和N切割產(chǎn)生的黏性末端是GATC (CTAG) ，粘性末端連接的話是DNA連接酶起作用。（3）通常用鈣離子處理細菌，使之處于感受態(tài) 。（4）基因表達載體的構(gòu)建中，需要標記基因，根據(jù)題意可知該標記基因為卡那霉素，因此需要在加入卡那霉素的培養(yǎng)基中選擇出成功轉(zhuǎn)入目的基因的菊花。（5）用PCR方法檢測轉(zhuǎn)基因菊花是否含有目的基因時，需根據(jù)抗蟲基因（目的基因）兩端的部分堿基序列設(shè)計特異引物，若其中一種引物共用了31個，則目的基因最多擴增了5次。（6）實驗設(shè)計遵循對照原則，因此對照組應該加入非轉(zhuǎn)基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料混合物；根據(jù)實驗組比對照組的死亡率高，說明轉(zhuǎn)基因菊花對菊天牛2齡幼蟲有較強的毒殺作用。

考點：本題主要考查基因工程，意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力。

練習冊系列答案

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科目：高中生物 來源：2010年四川省綿陽市南山中學高三考前模擬考試（理科綜合）生物部分 題型：綜合題

（22分）
Ⅰ、（14分）現(xiàn)有純種紫色種皮和純種白色種皮菜豆品系，用于探究菜豆的種皮顏色是由核基因還是質(zhì)基因控制。
（1）雜交時，應選用的親本組合是                、                  。收獲種子時，觀察到種皮顏色分別是                、                。
（2）將上述雜交實驗收獲的種子分別種下去，若無論正交和反交， F₁代所結(jié)種子的種皮性狀都只表現(xiàn)為紫色或白色一種，則控制種皮顏色的基因為       基因。若F₁代所結(jié)種子的種皮性狀                        ，則控制種皮顏色的基因為質(zhì)基因。
（3）假設(shè)菜豆的花色表現(xiàn)為白色(只含白色素)和黃色(含黃色錦葵色素)一對相對性狀，由兩對等位基因(A和a，B和b)共同控制，顯性基因A控制以白色素為前體物合成黃色錦葵色素的代謝過程，但當顯性基因B存在時可抑制其表達（生化機制如下圖所示）。則開黃花的菜豆植株的基因型可能是                           。若選擇AABB和aabb兩個純系菜豆品種雜交得F₁，F(xiàn)₁自交得F₂，則F₂中純合白花植株占                  。

Ⅱ、（8分）產(chǎn)前診斷是優(yōu)生的主要措施之檢查羊水和羊水中的胎兒脫落細胞，能反映胎
兒的病理情況。羊水檢查過程包括細胞
一，
二，
三，
四，
五，培養(yǎng)、
六，生化分析、基因分析、染色體分
七，析
八，
九，
十，等
十一，      。
十二，
十三，
十四，      甲圖是羊水檢查的主要過程，請據(jù)圖回答：

（1）在羊水細胞培養(yǎng)時，通常在合成培養(yǎng)基中加入適量       以補充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)，同時在適宜的外界環(huán)境條件下進行無菌培養(yǎng)。
（2）在染色體分析時，通常選用處于                  (時期)的細胞，主要觀察染色體的                         ；在生化分析時，可以用DNA分子探針進行基因診斷，其原理是             。
（3）乙圖是患甲�。ɑ駻、）和乙�。ɑ駼、）兩種遺傳病的系譜圖。假設(shè)II₃不是乙病基因的攜帶者，則乙病為            遺傳病。若III₉與III₁₂結(jié)婚，生育的子女患病的概率為              。

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科目：高中生物 來源：2014屆北京市海淀區(qū)高三上學期期中考試生物卷（解析版） 題型：綜合題

（8分）菊天牛是菊花的主要害蟲之一。科研人員將抗蟲基因轉(zhuǎn)入菊花，培育出抗蟲菊花。下圖是獲得轉(zhuǎn)基因菊花的技術(shù)流程，請據(jù)圖回答：

（注：卡那霉素抗性基因（kan^R）作為標記基因，菊花葉片對卡那霉素高度敏感。）

（1）為了促進土壤農(nóng)桿菌吸收重組質(zhì)粒，可用______________處理土壤農(nóng)桿菌，使其處于感受態(tài)。

（2）將重組質(zhì)粒導入土壤農(nóng)桿菌的目的是利用農(nóng)桿菌能夠_______________________的特點，使目的基因進入受體細胞中，并插入到菊花細胞的_______________上，最終形成轉(zhuǎn)基因植株。

（3）將愈傷組織轉(zhuǎn)移到添加一定濃度植物激素和_____________的培養(yǎng)基中，在適宜條件下進行培養(yǎng)，篩選轉(zhuǎn)基因菊花。

（4）用PCR方法檢測轉(zhuǎn)基因菊花是否含有目的基因時，需根據(jù)________________的核苷酸序列設(shè)計特異引物，以________________為模板進行第一輪擴增。

（5）將轉(zhuǎn)基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料以適當比例混合后飼喂菊天牛2 齡幼蟲，實驗結(jié)果如下表所示。

組別	死亡率（%）
實驗組	轉(zhuǎn)基因植株1	60.00
轉(zhuǎn)基因植株2	53.33
對照組	13.33

①對照組應飼喂等量的_______________________________。

②據(jù)表分析，______________________________差異顯著，說明轉(zhuǎn)基因菊花對菊天牛2齡幼蟲有較強的毒殺作用。

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科目：高中生物 來源：2010年四川省綿陽市高三考前模擬考試（理科綜合）生物部分 題型：綜合題

（22分）

Ⅰ、（14分）現(xiàn)有純種紫色種皮和純種白色種皮菜豆品系，用于探究菜豆的種皮顏色是由核基因還是質(zhì)基因控制。

（1）雜交時，應選用的親本組合是、。收獲種子時，觀察到種皮顏色分別是、。

（2）將上述雜交實驗收獲的種子分別種下去，若無論正交和反交， F₁代所結(jié)種子的種皮性狀都只表現(xiàn)為紫色或白色一種，則控制種皮顏色的基因為基因。若F₁代所結(jié)種子的種皮性狀，則控制種皮顏色的基因為質(zhì)基因。

（3）假設(shè)菜豆的花色表現(xiàn)為白色(只含白色素)和黃色(含黃色錦葵色素)一對相對性狀，由兩對等位基因(A和a，B和b)共同控制，顯性基因A控制以白色素為前體物合成黃色錦葵色素的代謝過程，但當顯性基因B存在時可抑制其表達（生化機制如下圖所示）。則開黃花的菜豆植株的基因型可能是。若選擇AABB和aabb兩個純系菜豆品種雜交得F₁，F(xiàn)₁自交得F₂，則F₂中純合白花植株占。