Question

9．花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因．用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力．再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株．流程如圖．

據(jù)圖回答下列問題：
（1）過程①所需的酶是纖維素酶和果膠酶，過程②依據(jù)的原理是生物膜的流動性．
（2）若分析再生植株的染色體變異類型，應(yīng)剪取再生植株和雙親植株的根尖，通過解離、漂洗、染色和制片等過程制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體的數(shù)目和結(jié)構(gòu)．
（3）過程②后，在顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有供體的葉綠體存在，這一特征可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志．
（4）原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是保持原生質(zhì)體的完整性．原生質(zhì)體經(jīng)過細(xì)胞壁再生，進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織．
（5）采用特異性引物對花椰菜和黑芥基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定．圖是用該引物對雙親及再生植株1-4進(jìn)行PCR擴(kuò)增的結(jié)果．據(jù)圖判斷，再生植株1-4中一定不是雜種植株的有3．

（6）對雜種植株進(jìn)行黑腐病菌接種實驗，可篩選出具有高抗性的雜種植株．

Answer 1

分析 據(jù)圖分析，過程①表示原生質(zhì)體的制備，要用纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，過程②體現(xiàn)了生物膜的結(jié)構(gòu)特點：一定的流動性．將雜種細(xì)胞培養(yǎng)成完整植株的過程是植物組織培養(yǎng)，經(jīng)過脫分化形成愈傷組織，再分化形成完整植株．

解答 解：（1）過程①表示原生質(zhì)體的制備，要用纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁．過程②表示原生質(zhì)體的融合，依據(jù)的原理是生物膜的流動性．
（2）若分析再生植株的染色體變異類型，應(yīng)剪取再生植株和雙親植株的根尖，通過解離、漂洗、染色和制片等過程制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體的數(shù)目和結(jié)構(gòu)．
（3）用于融合的兩個細(xì)胞，一個是黑芥苗的葉肉細(xì)胞，一個是花椰菜的根部細(xì)胞，其中供體細(xì)胞特有的結(jié)構(gòu)是葉綠體，可通過觀察葉綠體的有無作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志．
（4）原生質(zhì)體沒有細(xì)胞壁的保護(hù)，需要加入適宜濃度的甘露醇以保證滲透壓的穩(wěn)定，以避免原生質(zhì)體吸水或失水破壞原生質(zhì)體的完整性；原生質(zhì)體通過細(xì)胞壁再生形成雜種細(xì)胞，進(jìn)而形成愈傷組織．
（5）根據(jù)圖譜，花椰菜含有堿基對為300和600的DNA片段，黑芥含有堿基對為1000、1300和1500的DNA片段，再生植株3，只含有長度為300和600的片段，與花椰菜一致，1、2、4既含有花椰菜DNA片段，又含有黑芥DNA片段，為雜種植株．
（6）本實驗獲得的是抗黑腐病的雜種植株，因此對雜種植株進(jìn)行黑腐病菌接種實驗，可篩選出具有高抗性的雜種植株．
故答案為：
（1）纖維素酶和果膠酶     生物膜的流動性
（2）解離  染色體的數(shù)目和結(jié)構(gòu)
（3）葉綠體
（4）保持原生質(zhì)體的完整性
（5）3
（6）黑腐病菌

點評 本題結(jié)合圖解，考查植物體細(xì)胞雜交的相關(guān)知識，綜合考查了植物細(xì)胞工程、細(xì)胞分裂裝片的制作觀察、PCR 圖譜的識別等相關(guān)內(nèi)容，同時也考查了考生確判斷圖中各過程的名稱及采用的方法；能分析題文和題圖，從中提取有效信息答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．