Question

【題目】為了調(diào)查某城市自來水的水質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)定了自來水水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作�；卮鹣铝袉栴}：

(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量。涂布平板所用的培養(yǎng)基是__________(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基；該培養(yǎng)基的制備過程是_________________________________。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白培養(yǎng)基培養(yǎng)了一段時(shí)間，若空白培養(yǎng)基出現(xiàn)了菌落。請(qǐng)分析說明原因(寫出二個(gè))① ___________________② _______________。

(2)培養(yǎng)基滅菌后，將1mL水樣稀釋1000倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為51、50和49。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_________________ 。

(3)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌。操作時(shí)，每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，目的是_______________________的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于________________ 。

Answer 1

【答案】固體 計(jì)算→稱量→溶化→調(diào)PH→滅菌→倒平板 培養(yǎng)基滅菌不合格 倒平板過程被污染 5.0×108 殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留(或殺死接種環(huán)上) 上一次劃線末端

【解析】

微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

（1）涂布平板所用的培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的制備過程為：計(jì)算→稱量→溶化→調(diào)PH→滅菌→倒平板。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白培養(yǎng)基培養(yǎng)了一段時(shí)間，若空白培養(yǎng)基出現(xiàn)了菌落，其可能原因是：①培養(yǎng)基滅菌不合格；②倒平板過程被污染（或培養(yǎng)皿滅菌不合格）。

（2）根據(jù)題意分析，將1mL水樣稀釋1000倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為51、50和49，則每升水樣（1L=1000mL）中的活菌數(shù)=（51+50+49）÷3÷0.1×1000×1000=5.0×108個(gè)。

（3）在利用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌時(shí)，每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，目的是殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端。

	第一次灼燒	每次劃線之前灼燒	劃線結(jié)束灼燒
目的	避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基	殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種	殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染或感染操作者