Question

萌發(fā)的小麥種子中主要有α-淀粉酶(在pH3.6以下迅速失活，但耐熱)和β-淀粉酶(不耐熱，70℃條件下15min后就失活)。

實驗材料：萌發(fā)3天的小麥種子

主要器材：麥芽糖標準溶液、5%淀粉溶液、斐林試劑、蒸餾水、恒溫水浴鍋等

實驗目的：測定40℃條件下α-淀粉酶的催化效率

實驗步驟：

步驟一：制備不同濃度麥芽糖溶液與斐林試劑生成的標準顏色。取7支潔凈試管編號，按表中所示加入試劑，再將試管置于60℃水浴中加熱3min，取出后按編號排好。

試劑	試管
1	2	3	4	5	6	7
麥芽糖標準溶液(mL)	0	0.2	0.6	1.0	1.4	1.6	2.0
蒸餾水(mL)	X	1.8	Y	1.0	Z	0.4	0
斐林試劑(mL)	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0

表中Y代表的數(shù)值是______。

步驟二：制取α-淀粉酶溶液

①用_______________________制備淀粉酶溶液。

②將裝有淀粉酶溶液的試管置于__________________________，取出后迅速冷卻以獲得α-淀粉酶溶液。

步驟三：取A、B、C、D四只試管并分別作以下處理。

試管	1	2	3	1	2	3	C	D
5%淀粉溶液(mL)	2	2	2
α-淀粉酶溶液(mL)				2	2	2		2
蒸餾水(mL)							2
40℃水浴鍋中保溫(min)	0	0	0	0	0	0	0	0

步驟四：將A1和B1試管中溶液加入到E1試管中，A2和B2溶液加入到E2試管，A3和B3溶液加入到E3試管， C、D試管中的溶液均加入到F試管中，立即將E1、E2、E3、F試管在40℃水浴鍋中保溫一段時間。然后分別加入________________，并經(jīng)過___________________________后，觀察顏色變化。

結(jié)果分析：將E1、E2、E3試管中的顏色與___________________________進行比較，獲得該試管中麥芽糖濃度，并計算出a-淀粉酶的催化效率的平均值。

討論：

(1)實驗中F試管所起的具體作用是排除_______________________對實驗結(jié)果的干擾從而對結(jié)果進行校對。

(2)若要測定β-淀粉酶的活性，則需要對步驟_______進行改變，具體的操作是將_________________________________________一段時間從而獲得β-淀粉酶。

 

Answer 1

【答案】

步驟一：1.4     步驟二：①萌發(fā)的小麥種子    ②70℃怛溫箱中15min(大于70℃且長于15min也可)     步驟四：2mL斐林試劑        60℃水浴中加熱3min      結(jié)果分析：1-7號試管

討論：(1)淀粉酶溶液中還原糖   (2)二        淀粉酶溶液置于pH低于3.6溶液中

【解析】

試題分析：由表中數(shù)據(jù)可知，蒸餾水+麥芽糖標準溶液=2mL，所以表中X為2、Y為1.4、Z為0.6。本題實驗的目的是測定40℃條件下α-淀粉酶的催化效率，可用萌發(fā)的小麥種子制取α-淀粉酶溶液，但萌發(fā)的小麥種子也含有β-淀粉酶，所以需除去β-淀粉酶以防止干擾實驗結(jié)果。因為α-淀粉酶在pH3.6以下迅速失活，但耐熱，β-淀粉酶不耐熱，在70℃條件下15min后就失活，所以將制備的淀粉酶溶液置于70℃怛溫箱中15min，取出后迅速冷卻以即可獲得α-淀粉酶溶液（若要測定β-淀粉酶的活性，則需將制備的淀粉酶溶液置于pH低于3.6溶液中，獲得β-淀粉酶溶液）。反應(yīng)結(jié)束后，需用斐林試劑進行鑒定，使用斐林試劑時需要在60℃水浴中加熱3min后，再觀察顏色變化。最后將E1、E2、E3試管中的顏色與1-7號試管進行比較，獲得該試管中麥芽糖濃度，并計算出a-淀粉酶的催化效率的平均值。實驗中F試管時對照組，作用是排除淀粉酶溶液中還原糖對實驗結(jié)果的干擾從而對結(jié)果進行校對。

考點：本題考查與酶相關(guān)的探究實驗，意在考查考生具備驗證簡單生物學事實的能力，并能對實驗現(xiàn)象和結(jié)果進行解釋、分析和處理。