Question

【題目】人心肌細(xì)胞中的肌鈣蛋白由三個(gè)結(jié)構(gòu)不同的亞基組成，即肌鈣蛋白T（cTnT）、肌鈣蛋白I（cTnI）和 肌鈣蛋白C（cTnC），其中肌鈣蛋白I（cTnI）在血液中含量上升是心肌損傷的特異指標(biāo)。為制備抗cTnI的單克隆抗體，科研人員完成了以下過(guò)程。

（1）細(xì)胞培養(yǎng)中，為防止有害代謝物的積累，可采用_________________的方法。每隔2周用cTnI作為抗原注射小鼠一次，共注射三次，其目的是_________________，最后一次免疫后第3天，取脾臟內(nèi)部分組織制成細(xì)胞懸液與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合，常用的誘導(dǎo)因素是__________。

（2）甲、乙、丙中，只含雜交瘤細(xì)胞的是____________，②過(guò)程表示將乙細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上，進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)，之后稀釋、培養(yǎng)、再檢測(cè)，并多次重復(fù)上述操作，其目的是篩選獲得能產(chǎn)生___________________的抗cTnI抗體的雜交瘤細(xì)胞。

（3）酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法是醫(yī)學(xué)上常用的定量檢測(cè)抗原的方法，具體原理如下圖：

據(jù)圖分析，固相抗體和酶標(biāo)抗體均能與抗原結(jié)合，這是由于不同抗體與同一抗原表面的_________結(jié)合。該檢測(cè)方法中，酶標(biāo)抗體的作用是__________________，可通過(guò)測(cè)定產(chǎn)物量來(lái)判斷待測(cè)抗原量。

（4）研究人員獲得三種抗cTnI單克隆抗體，分別記為A、B、C。為檢測(cè)哪兩種單克隆抗體適合用于雙抗體夾心法，科研人員需要進(jìn)行_________組實(shí)驗(yàn)。

Answer 1

【答案】 定期更換培養(yǎng)液 加強(qiáng)免疫，刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞 滅活的病毒（PEG） 乙和丙 特異性強(qiáng)、靈敏度高 不同部位 與待測(cè)抗原結(jié)合，酶催化檢測(cè)底物反應(yīng) 6

【解析】【試題分析】

本題以制備抗cTnI的單克隆抗體為載體，結(jié)合圖解，考查制備單克隆抗體的相關(guān)知識(shí)，第（3）小題又設(shè)置了新的情境，考查考生的實(shí)驗(yàn)分析能力和識(shí)圖能力，以及獲取信息的能力。解答本題需要考生熟知制備單克隆抗體的流程、原理和單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)，結(jié)合題意梳理回顧所學(xué)知識(shí)，對(duì)各小題進(jìn)行解答。最后兩道小題考生要根據(jù)從題圖中獲取的信息，再結(jié)合所學(xué)知識(shí)進(jìn)行答題。

（1）細(xì)胞培養(yǎng)中，為防止有害代謝物的積累對(duì)自身造成危害，可采用定期更換培養(yǎng)液的方法，以便清除代謝產(chǎn)物。每隔2周用cTnI作為抗原注射小鼠一次，共注射三次，其目的是加強(qiáng)免疫，刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素是滅活的病毒（PEG）。

（2）圖中①②依次表示單克隆抗體制備過(guò)程中的兩次篩選，其中①第一次是用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，②第二次是通過(guò)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)篩選出能產(chǎn)生抗cTnI抗體的雜交瘤細(xì)胞。因此，甲、乙、丙中，只含雜交瘤細(xì)胞的是乙和丙；②過(guò)程目的是篩選獲得能產(chǎn)生特異性強(qiáng)、靈敏度高的抗cTnI抗體的雜交瘤細(xì)胞。

（3）據(jù)圖分析，固相抗體和酶標(biāo)抗體均能與抗原結(jié)合，這是由于不同抗體與同一抗原表面的不同部位結(jié)合。該檢測(cè)方法中，酶標(biāo)抗體的作用是與待測(cè)抗原結(jié)合，酶催化檢測(cè)底物反應(yīng)，可通過(guò)測(cè)定產(chǎn)物量來(lái)判斷待測(cè)抗原量。

（4）根據(jù)題意，為檢測(cè)A、B、C中哪兩種單克隆抗體適合用于雙抗體夾心法，科研人員需要進(jìn)行6組實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)并比較各組實(shí)驗(yàn)的產(chǎn)物量。