Question

13．圖是將基因A導入大腸桿菌細胞內(nèi)制備“工程菌”的示意圖．請回答問題：

（1）可用基因A的mRNA為模板，通過逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成雙鏈DNA，然后在DNA聚合酶的作用下合成雙鏈DNA，從而獲得基因A．
（2）對獲得的基因A通常采用PCR（多聚酶鏈式反應）技術(shù)來擴增其數(shù)量，在該過程所用酶最大的特點是耐高溫．
（3）由基因A和載體B拼接形成基因表達載體C，C的組成包括基因A、啟動子、終止子和標記基因．
（4）將基因A導入大腸桿菌D之前，常用Ca²⁺處理大腸桿菌以便吸收重組DNA分子．可以通過基因表達載體上的標記基因來篩選含有基因A的受體細胞，從而獲得工程菌．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示是將某細菌的基因A導入大腸桿菌內(nèi)，制備“工程菌”的示意圖，其中A為目的基因，B為運載體（質(zhì)粒），C為重組質(zhì)粒，D為受體細胞．

解答 解：（1）獲得A有兩條途徑：一是以A的mRNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下，通過逆轉(zhuǎn)錄過程合成單鏈DNA，再在DNA聚合酶的作用下合成雙鏈DNA，從而獲得所需基因；二是根據(jù)目標蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測出相應的mRNA序列，然后按照堿基互補配對原則，推測其DNA的脫氧核苷酸序列，再通過人工合成（化學）方法合成所需基因．
（2）PCR技術(shù)可在體外擴增目的基因，該過程是在高溫環(huán)境中進行的，因此需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶．
（3）由A和載體B拼接形成的C稱為基因表達載體，基因表達載體的組成包括啟動子、標記基因、目的基因和終止子等．
（4）將目的基因?qū)�入微生物細胞時，常用Ca²⁺處理，使其成為感受態(tài)細胞，使大腸桿菌更容易吸收重組DNA分子，這樣可以提高受體細胞的轉(zhuǎn)化率．表達載體上的標記基因用于篩選含有基因A的受體細胞，從而獲得工程菌．
故答案為：
（1）逆轉(zhuǎn)錄    DNA聚合    
（2）PCR（多聚酶鏈式反應） 耐高溫    
（3）啟動子  終止子   
（4）Ca²⁺  標記基因

點評 本題結(jié)合制備“工程菌”的示意圖，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握步驟中的相關(guān)細節(jié)，能結(jié)合所學的知識準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．