Question

某質(zhì)粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamH I三種限制酶切割位點，同時還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過程如圖所示，請回答下列問題。

（1）將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒分別用Sal I酶切，酶切產(chǎn)物用______________催化連接，兩個DNA片段的連接結(jié)果有      種。
（2）將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的煙草細胞培育成完整的植株需要用_____________________技術(shù)，愈傷組織經(jīng)             進而形成完整植株，此過程除營養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加                 。

Answer 1

（1）DNA連接酶       3
（2）植物組織培養(yǎng)     再分化      植物激素（細胞分裂素或生長素）

解析試題分析：（1）將DNA片段連接起來用的是DNA連接酶，兩個DNA片段的連接存在質(zhì)粒與質(zhì)粒連接、質(zhì)粒與目的基因連接、目的基因與目的基因連接3種連接方式。
（2）要將單個的細胞培育成完整的植株需要利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，愈傷組織通過細胞分化和細胞增殖發(fā)育成完整植株。在植物組織培養(yǎng)過程中植物激素（生長素和細胞分裂素）起著關(guān)鍵性的作用，當(dāng)生長素與細胞分裂素含量相當(dāng)時，有利于脫分化，當(dāng)生長素大于細胞分裂素時，有利于生根，當(dāng)生長素含量小于細胞分裂素時，有利于生芽。
考點：本題考查基因工程操作步驟
點評：本題難度中等，屬于考綱理解層次。解答本題的關(guān)鍵是理解基因工程的操作步驟以及植物組織培養(yǎng)的過程——脫分化和再分化。