Question

2．微生物培養(yǎng)與分離技術是生物中重要的實驗技術．根據(jù)有關的微生物知識，回答下列問題：
（1）培養(yǎng)基的制備需經過計算、稱量、溶化和滅菌、倒平板等過程．上述過程中，需要在超凈工作臺上操作的是倒平板．
（2）純化菌種時為了得到單一菌落，常采用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法；在對培養(yǎng)液中酵母菌的種群數(shù)量進行統(tǒng)計時，計數(shù)的方法是顯微直接計數(shù)法．
（3）為達到篩選土壤中分解尿素細菌的目的，平板內的固體培養(yǎng)基應選擇尿素作為唯氮源；培養(yǎng)基中加入指示劑酚紅以鑒定其中是否含有能分解尿素的細菌．
（4）若要篩選分解纖維素的細菌，在土壤取樣、選擇培養(yǎng)后，需進行梯度稀釋和涂布平板操作，通過染色并觀察菌落周圍透明圈的有無挑選出所需菌種．

Answer 1

分析 制備培養(yǎng)基的步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板．微生物接種的核心是防止雜菌的污染，保證培養(yǎng)物的純度．
純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法．前者是指通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種，逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面；后者是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)．
從土壤中分離尿素分解菌的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．尿素分解菌產生的脲酶能夠將以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中的尿素分解為氨，使pH升高，培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑后呈紅色．

解答 解：（1）培養(yǎng)基的制備需經過計算、稱量、溶化和滅菌、倒平板等過程，上述過程中需要在超凈工作臺上操作的是倒平板，防止雜菌的污染．
（2）純化菌種時為得到單菌落，常采用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，對培養(yǎng)液中酵母菌的種群數(shù)量進行統(tǒng)計時，計數(shù)的方法是顯微直接計數(shù)法．
（3）為達到篩選土壤中分解尿素細菌的目的，平板內的固體培養(yǎng)基應以尿素作為唯一的氮源，培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)．
（4）篩選分解纖維素的細菌，在土壤取樣、選擇培養(yǎng)后，需進行梯度稀釋和平板涂布操作，通過剛果紅染色并觀察菌落周圍透明圈的有無挑選出所需菌種．
故答案為：
（1）滅菌　倒平板　倒平板
（2）平板劃線法　　稀釋涂布平板法   顯微直接計數(shù)法
（3）氮源　酚紅
（4）梯度稀釋　　　涂布平板　　菌落周圍透明圈

點評 本題考查微生物培養(yǎng)與分離技術的相關知識，意在考查學生的識記能力和判斷能力，運用所學知識綜合分析問題的能力．