Question

【題目】下圖是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人胰島素的操作過程示意圖。請據(jù)圖作答：

（1）過程①不能用人的口腔上皮細胞來完成，原因是___________。

（2）與基因組文庫中提取的目的基因相比，過程②的產(chǎn)物由于沒有_______序列，便于進行物種間的基因交流；用_________（試劑）可以檢驗該過程產(chǎn)物的化學本質(zhì)。

（3）在體外得到大量DNA的PCR技術(shù)，與體內(nèi)DNA復制的區(qū)別之一是反應溫度不同。PCR中首先用95℃高溫處理，目的是____________，而這一過程在細胞內(nèi)是通過__________實現(xiàn)的。另外，PCR過程中使用的一對引物使大量擴增出的DNA片段具有_________________性。

（4）若⑥過程產(chǎn)生平末端，則⑦過程要用__________酶形成重組分子，C中標記基因的作用是____________。

Answer 1

【答案】 口腔上皮細胞中的胰島素基因不表達（轉(zhuǎn)錄） 內(nèi)含子 二苯胺 使DNA解旋 解旋酶 特異 T4DNA連接 用于篩選出導入了目的基因的受體細胞

【解析】試題分析：圖示是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)胰島素的操作過程示意圖．圖中①表示從胰島B細胞中獲取胰島素mRNA的過程；②為逆轉(zhuǎn)錄過程，A為胰島素基因；③④⑤表示目的基因的擴增過程；⑥表示用限制酶切割運載體形成黏性末端的過程；⑦表示基因表達載體的構(gòu)建過程；⑧表示將目的基因?qū)�入受體細胞的過程；⑨表示目的基因隨著受體細胞的增殖和擴增；⑩是從培養(yǎng)液中獲取胰島素的過程。

（1）①過程是從胰島細胞中獲取胰島素mRNA的過程，由于在基因表達是選擇性表達的，人的肝臟細胞中不轉(zhuǎn)錄出胰島素mRNA，因此不能利用人的肝臟細胞來完成①過程。

（2）②為逆轉(zhuǎn)錄過程或反轉(zhuǎn)錄過程，以mRNA形成DNA的過程，產(chǎn)物DNA中不含有內(nèi)含子。在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑，因此可以用二苯胺檢驗該過程產(chǎn)物的化學本質(zhì)。

（3）PCR中首先用95℃高溫處理，目的是打開兩條鏈之間的氫鍵，使DNA解旋（兩條鏈解開螺旋），在細胞內(nèi)是通過解旋酶使氫鍵斷裂。PCR過程中的引物實質(zhì)是單鏈DNA，可以與一段模板鏈發(fā)生堿基互補配對，因此大量擴增出的DNA片段具有特異性。

（4）⑦過程是構(gòu)建基因表達載體的過程，要用到DNA連接酶連接目的基因和運載體，從而形成重組分子。標記基因的作用是用于篩選出導入了目的基因的受體細胞。