Question

【題目】我國規(guī)定1升自來水中大腸桿菌不得超過3個。在培養(yǎng)基中加入伊紅美藍，可以使大腸桿菌的菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤。有關部門據(jù)此對自來水中的大腸桿菌進行檢測。具體步驟大致如下：

（一）用火焰灼燒自來水龍頭3分鐘，然后打開水龍頭放水5分鐘，再用無菌的三角瓶接取1000毫升水樣，蓋好瓶塞。

（二）將漏斗和抽濾瓶固定好，用鑷子夾住濾膜邊緣，將水樣倒入漏斗中，邊抽濾、邊加水。

（三）用鑷子將濾膜取出、放在無菌平板上進行培養(yǎng)，觀察并記錄實驗結果。

回答下列問題：

（1）實驗中所用的醋酸纖維素濾膜、漏斗、抽濾瓶、鑷子等實驗器材和培養(yǎng)基都需先用____________法進行滅菌。如需檢測培養(yǎng)基滅菌是否徹底，常用的方法是_____。

（2）制作本實驗所用的無菌平板時，需要加入_______、水、無機鹽等大腸桿菌所必需的營養(yǎng)成分，以及加入______，便于統(tǒng)計菌落外；還需要將培養(yǎng)基的pH調整至____________性。鑒別是否有大腸桿菌菌落，需要在培養(yǎng)基中加入__________。

（3）按上述步驟制作的3個樣品平板上所有的菌落數(shù)分別為49、51、47。能否據(jù)此得出每升水樣中大腸桿菌數(shù)約為49的結論？__________。理由是________________。

Answer 1

【答案】 高壓蒸汽滅菌 將滅菌過的培養(yǎng)基在適宜的條件下培養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生 碳源和氮源 瓊脂 中性或微堿 伊紅美藍 不能 培養(yǎng)基表面生長的菌落，只有部分是大腸桿菌的菌落

【解析】試題分析：閱讀題干和題圖可知，本題是檢測自來水中大腸桿菌數(shù)目的題目，先樹立微生物的實驗室培養(yǎng)技術，然后根據(jù)問題涉及的具體內容分析回答。

（1）培養(yǎng)基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌，檢測培養(yǎng)基滅菌是否徹底，常用的方法是將滅菌過的培養(yǎng)基在適宜的條件下培養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。

（2）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基需要碳源、氮源、水和無機鹽。統(tǒng)計微生物數(shù)目要用固定培養(yǎng)基，因此培養(yǎng)基需要加入瓊脂。大腸桿菌生長的最適合pH為中性或微堿性，伊紅美藍是專一鑒定大腸桿菌的指示劑，利用伊紅美蘭培養(yǎng)基可以鑒定大腸桿菌。

（3）該培養(yǎng)基是鑒別培養(yǎng)基，在平板上生長的菌落，只有部分是大腸桿菌形成的菌落，因此大腸桿菌數(shù)實際數(shù)值應該小于49。