Question

【題目】現(xiàn)代生物技術(shù)。

圖1是醫(yī)學(xué)研究中制備抗體的兩種技術(shù)路線模式簡(jiǎn)圖。

（1）細(xì)胞N是______。過程①中，若僅考慮二個(gè)細(xì)胞間的融合，則融合后的細(xì)胞種類有______種。

（2）通過①②獲得抗體m 的過程中，需要經(jīng)過二次篩選。分析原因______。

圖2示基因J所在的DNA片段，圖3示質(zhì)粒的部分堿基序列。（現(xiàn)有 4種限制酶：MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、EcoRⅠ，能識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、G↓AATTC）

（3）據(jù)圖2、3分析，過程④中不能（宜）使用的限制酶有______。

A．MspⅠ B．BamHⅠ C．MboⅠ D．EcoRⅠ

（4）將重組的大腸桿菌置于培養(yǎng)皿內(nèi)培養(yǎng)，為保證獲得單個(gè)菌落，適宜的接種方法有______。

（5）圖1中涉及的生物技術(shù)有______。

A．細(xì)胞融合 B．細(xì)胞核移植 C．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) D．微生物轉(zhuǎn)基因

Answer 1

【答案】B淋巴細(xì)胞 3 融合后有融合細(xì)胞和未融合細(xì)胞，第一次篩選出融合細(xì)胞（雜交瘤細(xì)胞）；雜交瘤細(xì)胞表面抗原受體有差異，能產(chǎn)生不同抗體，第二次篩選出單一抗體的雜交瘤細(xì)胞 ACD 劃線接種法和稀釋涂布法 ACD

【解析】

圖中①②是通過動(dòng)物細(xì)胞融合、雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)獲得單克隆抗體的過程；③④⑤是通過基因工程獲得單克隆抗體的過程。

（1）單克隆抗體是由雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的，雜交瘤細(xì)胞是由漿細(xì)胞和骨髓性細(xì)胞融合形成的，因此細(xì)胞N是已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞。①是細(xì)胞融合過程，若僅考慮二個(gè)細(xì)胞間的融合，則融合后的細(xì)胞種類有3種，即漿細(xì)胞自身融合的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞。

（2）通過①②獲得單克隆抗體的過程中，需要經(jīng)過二次篩選，原因是：融合后有融合細(xì)胞和未融合細(xì)胞，第一次篩選出融合細(xì)胞（雜交瘤細(xì)胞）；雜交瘤細(xì)胞表面抗原受體有差異，能產(chǎn)生不同抗體，第二次篩選出單一抗體的雜交瘤細(xì)胞。

（3）用限制酶MspⅠ切割會(huì)破壞目的基因，用限制酶MboⅠ切割會(huì)破壞兩種抗生素抗性基因，又含有目的基因的外源DNA和運(yùn)載體上都沒有限制酶EcoRⅠ的切割位點(diǎn)，因此過程④中不能（宜）使用的限制酶有ACD。

（4）接種微生物常用劃線接種法和稀釋涂布法。

（5）圖1中涉及的生物技術(shù)有細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、微生物轉(zhuǎn)基因