Question

【題目】農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞采用最多的方法�；卮鹣铝袉�(wèn)題：

（1）與其它細(xì)菌相比，農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的____________可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并插入到植物細(xì)胞中的___________上。由此推斷，用Ti質(zhì)粒構(gòu)建目的基因的表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)將目的基因插入該片段______（填“內(nèi)”或“外”）部。目的基因在受體細(xì)胞中插入該位置使得它的遺傳特性能在宿主細(xì)胞中________________。

（2）構(gòu)建的基因表達(dá)載體中除含有目的基因外，還必須具有________________________等元件，其中必須位于目的基因上游的元件是____________。

（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法更適合于_____________（填“單子葉”或“雙子葉”）植物的轉(zhuǎn)化，原因是該類(lèi)植物體受到損傷時(shí)，傷口處會(huì)分泌大量的________________________，吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞。

Answer 1

【答案】T—DNA 染色體的DNA 內(nèi) 穩(wěn)定維持和表達(dá)（或復(fù)制和表達(dá)） 啟動(dòng)子、終止子以及標(biāo)記基因 啟動(dòng)子 雙子葉 酚類(lèi)物質(zhì)

【解析】

基因工程的基本操作程序包括：目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。由于受體細(xì)胞種類(lèi)不同，目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法不同。

（1）農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上含有可轉(zhuǎn)移的DNA即T—DNA，將目的基因插入到T—DNA中，通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可能使目的基因進(jìn)入植物細(xì)胞，并插入到植物細(xì)胞中的染色體DNA上。目的基因插入植物染色體DNA中后，就可以隨著染色體DNA的復(fù)制而復(fù)制，可以進(jìn)行自身的轉(zhuǎn)錄，也就是說(shuō)其遺傳特性能得以穩(wěn)定維持和表達(dá)。

（2）構(gòu)建的基因表達(dá)載體中，除含有目的基因外，還必須具有啟動(dòng)子、終止子以及標(biāo)記基因等元件，其中啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄成mRNA，最終獲得所需要的蛋白質(zhì)。

（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法更適用于雙子葉植物，因?yàn)殡p子葉植物在植物體受到損傷時(shí)，傷口處的細(xì)胞會(huì)分泌大量的酚類(lèi)物質(zhì)，吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞，這時(shí)農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒上的T—DNA就可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上。