Question

【題目】干擾素是一種重要的免疫物質(zhì)，具有抗病毒、調(diào)節(jié)免疫等功效。研究人員利用基因工程通過培育山羊乳腺生物反應(yīng)器大量生產(chǎn)β-干擾素。請回答下列問題：

（1）獲取人β-干擾素基因常用的方法有兩種，一種是從人的相應(yīng)細(xì)胞中獲取該基因的mRNA 逆轉(zhuǎn)錄合成___________，該過程需要的酶是____________。另一種是PCR技術(shù)，該技術(shù)的原理是________________，在PCR過程中，需用到______________酶。

（2）重組人β-干擾素基因表達(dá)載體由山羊β-酪蛋白基因啟動子、人β-干擾素基因、標(biāo)記基因和終止子等組成，其中___________________決定了人β-干擾素基因只能在山羊乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)，將該重組表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞一般采用______________________。

（3）一般需要將重組人β-干擾素基因表達(dá)載體導(dǎo)入___________________（填“雄性”或“雌性”）胚胎細(xì)胞中。在轉(zhuǎn)基因羊發(fā)育成熟時，為了檢測羊奶中是否有人β-干擾素，可用________________________方法。

Answer 1

【答案】cDNA 逆轉(zhuǎn)錄酶 DNA雙鏈復(fù)制 Taq(或耐高溫DNA聚合) 山羊β-酪蛋白基因啟動子 顯微注射法 雌性 抗原-抗體雜交

【解析】

基因工程操作的四個基本步驟是：獲取目的基因，基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞和目的基因的檢測與鑒定。培育轉(zhuǎn)基因動物時，一般用受精卵和胚胎干細(xì)胞作為受體細(xì)胞，因為這些細(xì)胞的全能性最大，易培養(yǎng)出一個新個體。當(dāng)動物細(xì)胞作受體細(xì)胞時，一般采用顯微注射法將目的基因?qū)�入�?/span>

（1）獲取人β-干擾素基因常用的方法有兩種，一種是逆轉(zhuǎn)錄法，即從相應(yīng)細(xì)胞中獲取mRNA，通過逆轉(zhuǎn)錄的過程獲得cDNA，該過程需要用到逆轉(zhuǎn)錄酶、脫氧核苷酸等。另一種是PCR技術(shù)，PCR的原理是DNA雙鏈復(fù)制；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物；擴(kuò)增過程是在較高溫度下進(jìn)行的，因此需要加入耐高溫的DNA聚合酶（或Taq酶）。

（2）啟動子能夠啟動基因的轉(zhuǎn)錄，重組人β-干擾素基因表達(dá)載體中的山羊β-酪蛋白基因啟動子決定了人β-干擾素基因只能在山羊乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)。培育轉(zhuǎn)基因動物時，常以受精卵為受體細(xì)胞，且將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法。故將該重組表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞一般采用顯微注射法。

（3）雌羊能夠泌乳，故一般需要將重組人β-干擾素基因表達(dá)載體導(dǎo)入雌性胚胎細(xì)胞中。在轉(zhuǎn)基因羊發(fā)育成熟時，為了檢測羊奶中是否有人β-干擾素，可用抗原-抗體雜交的方法。