Question

12．如圖為某種哺乳動物體細胞核移植過程圖．回答下列問題．

（1）①處需要用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）等處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)；細胞培養(yǎng)需要O₂和CO₂，CO₂的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．
（2）卵母細胞在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期時進行去核．與去核卵母細胞融合的供體細胞培養(yǎng)一般不會超過10代，原因是10代以后的細胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生突變（或保證供體細胞正常的遺傳基礎）．激活受體細胞除了用電刺激的方法外，還可以用鈣離子載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等．（寫一種實際方法）
（3）動物細胞核移植的難度高于胚胎細胞核移植的原因是動物胚胎細胞分化程度低，恢復其全能性十分困難．

Answer 1

分析 體細胞核移植過程：（以克隆高產(chǎn)奶牛為例）

注意：
①細胞核移植技術中注入去核卵母細胞中的不是供體細胞核，而是整個細胞，伴隨著兩細胞融合，體現(xiàn)細胞膜的結(jié)構(gòu)特點：具有一定的流動性．
②受體細胞為減數(shù)第二次分裂中期的次級卵母細胞，此時在透明帶內(nèi)包含著第一極體，在去核的同時連同第一極體一并去掉．
③該技術形成重組細胞發(fā)育成一個新個體，體現(xiàn)了細胞核的全能性而非動物細胞的全能性．
④用卵母細胞做受體細胞原因：a．卵母細胞體積大，便于操作；b．含有促使細胞核表達全能性的物質(zhì)；c．營養(yǎng)物質(zhì)豐富
⑤克隆屬于無性繁殖，產(chǎn)生新個體的性別、絕大多數(shù)性狀與供核親本一致．

解答 解：（1）細胞貼壁后，用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理使細胞分散，制成細胞懸液．細胞培養(yǎng)需要提供O₂和CO₂等氣體環(huán)境，CO₂的作用主要是維持培養(yǎng)液的pH．
（2）卵母細胞在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期時進行去核．10代以后的細胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生突變（或保證供體細胞正常的遺傳基礎），因此一般選用傳代10代以內(nèi)的細胞應用于核移植的供體細胞．激活受體細胞可以用物理和化學方法，如電刺激、鈣離子載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等．
（3）動物胚胎細胞分化程度低，恢復其全能性十分困難，因此動物體細胞核移植的難度高于胚胎細胞核移植．
故答案為：
（1）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）      維持培養(yǎng)液的pH
（2）減數(shù)第二次分裂中期     10代以后的細胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生突變（或保證供體細胞正常的遺傳基礎）              鈣離子載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等
（3）動物胚胎細胞分化程度低，恢復其全能性十分困難

點評 本題考查動物體細胞核移植，要求考生識記動物體細胞核移植的概念及過程，利用所學的知識，準確判斷圖中各過程采用的技術手段．