Question

【題目】乳酸菌和我們的生活緊密相連，現(xiàn)欲從泡菜濾液中分離乳酸菌。請回答下列相關問題。

（1）要純化培養(yǎng)乳酸菌，在配制固體培養(yǎng)基時，除了要加入各種營養(yǎng)物質外，一般還要加入瓊脂。培養(yǎng)基中的(NH4)2CO3____________（能/不能）為乳酸菌提供碳源 ，原因是___________________________。

（2）純化培養(yǎng)乳酸菌時，可采用_____法進行接種。為了能鑒別乳酸菌菌落，往往在配制培養(yǎng)基時加入碳酸鈣，原因是_____。

（3）甲、乙同學測定泡菜濾液中微生物的濃度。在對應稀釋倍數(shù)為105的培養(yǎng)基中，得到以下兩種統(tǒng)計結果：乙同學在該濃度下涂布了平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)為49；丙同學在該濃度下涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別為43、54、287，然后取其平均值128作為統(tǒng)計結果。 請評價這兩位同學的實驗結果的有效性。

①乙同學的結果_____，原因是_____。

②丙同學的結果_____，原因是_____。

（4）丁同學采用血細胞計數(shù)板計數(shù)(規(guī)格為16×25，16個中方格，每個中方格有25個小方格，體積為0.1mm3)，統(tǒng)計4個中格中的細菌數(shù)，計算出每個小格所含細菌的平均數(shù)為3個， 則每毫升樣品中的細菌數(shù)是(稀釋倍數(shù)為104)_____個。

Answer 1

【答案】不能 乳酸菌為異養(yǎng)生物只能利用含碳有機物 平板劃線法或稀釋涂布平板法 乳酸菌產生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣，形成透明圈 無效 沒有設置重復實驗，結果不具有說服力 無效 一個平板上的菌落計數(shù)結果與另外兩個相差太大 1.2×1011

【解析】

制作泡菜時需要用到乳酸菌，乳酸菌是一種厭氧菌，在無氧條件下，乳酸菌發(fā)酵產生乳酸，使得泡菜呈現(xiàn)特殊的風味。乳酸菌的代謝類型為異養(yǎng)厭氧性，因此培養(yǎng)乳酸菌時需要提供有機碳源并且隔絕氧氣；乳酸菌經(jīng)過發(fā)酵可產生乳酸，乳酸會與碳酸鈣反應而使加入碳酸鈣的培養(yǎng)基出現(xiàn)透明圈反應。

（1）由于乳酸菌為異養(yǎng)生物，只能利用含碳有機物，因此培養(yǎng)基中的(NH4)2CO3不能為乳酸菌提供碳源。

（2）純化培養(yǎng)乳酸菌時，可采用平板劃線法或稀釋涂布平板法進行接種。由于乳酸菌產生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣，形成透明圈，因此為了能鑒別乳酸菌菌落，往往在配制培養(yǎng)基時加入碳酸鈣。

（3）①甲同學的實驗結果是無效的，因為其只涂布了一個平板，沒有設置重復實驗，結果不具有說服力。

②乙同學的實驗結果也是無效的，因一個平板上的菌落計數(shù)結果與另外兩個相差太大，不能簡單的用其平均數(shù)。

（4）根據(jù)題干提供的數(shù)據(jù)進行計算，每毫升樣品中的細菌數(shù)(稀釋倍數(shù)為104)=3×16×25÷0.1×1000×104=1.2×1011。