下列圖1和圖2分別表示固定化酶的反應柱示意圖和凝膠色譜法分離蛋白質的示意圖,二者具有一定的相似性,結合圖示回答相關問題。
(1)圖1中的固定化酶是 ,能將葡萄糖轉化成果糖,固定該酶的方式為 (“包埋法”“化學結合法”或“物理吸附法”);而對于固定化酵母細胞多采用 法。
(2)圖1中利用固定化酶與直接使用酶催化反應相比有哪些優(yōu)點?
(3)圖2中的凝膠顆粒實際上是一些微小的 ,圖2中最先流出的是相對分子質量 (填“較大”或“較小”)的蛋白質,原因是
。
(4)圖1中的反應柱和圖2中的凝膠色譜柱均處于磷酸緩沖溶液中,緩沖溶液的作用是 。
答案:(1)葡萄糖異構酶 物理吸附法 包埋 (2)①固定化酶能與產(chǎn)物分離,提高產(chǎn)物的純度;②固定化酶可以重復使用,提高酶的利用率。 (3)多孔球體 較大 相對分子質量較大的蛋白質無法進入凝膠內(nèi)部通道,只能在凝膠外部移動,移動路程短,移動速率較快 (4)維持蛋白質(酶)的結構和活性
解析:葡萄糖異構酶能將葡萄糖轉化成果糖,圖1中固定酶的方法為物理吸附法;包埋法是固定化酵母細胞常用的方法。由于固定化酶能與產(chǎn)物分離,因此提高了產(chǎn)物的純度;同時,固定化酶能夠重復利用,因此提高了酶的利用率。在分離蛋白質的凝膠色譜法中,凝膠顆粒實際上是一些微小的多孔球體,由于大分子的蛋白質不能進入凝膠內(nèi)部通道,只能在凝膠外部移動,故移動路程短,移動速率快,最先流出層析柱。蛋白質的空間結構受pH影響,用磷酸緩沖溶液的目的是維持蛋白質適宜的pH環(huán)境,避免蛋白質結構被破壞。
科目:高中生物 來源:2012-2013學年江蘇省高三最后一次模擬考試生物試卷 題型:綜合題
回答下列關于基因工程的問題。
草甘膦是一種廣譜除草劑,其除草機制是抑制植物體內(nèi)EPSPS酶的合成,最終導致植物死亡。但是,它的使用有時也會影響到植物的正常生長。目前,已發(fā)現(xiàn)可以從一種抗草甘膦的大腸桿菌突變株中分離出EPSPS基因,若將該基因轉入植物細胞內(nèi), 從而獲得的轉基因植物就能耐受高濃度的草甘膦。
下圖A-F表示6株植物,其中,植物A和D對草甘膦敏感,B和E對草甘膦天然具有抗性,C和F則經(jīng)過了轉基因處理,但是是否成功還未知。圖1和2分別表示兩段DNA序列。表格中1-4分別表示4種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點。據(jù)圖回答下列問題:
(1)若A-C澆清水,D-F澆的水中含有草甘膦,上述植物中,肯定能健康成長的是_________。
(2)若要從大腸桿菌中篩選出含EPSPS基因的突變菌株甲,在大腸桿菌培養(yǎng)基中還必須加入 ___________。
(3)假設位于EPSPS基因兩側的DNA序列均如圖1所示,則應選擇表中酶__________進行酶切;若位于EPSPS基因兩側的DNA序列分別如圖1和2所示,則應選擇表中酶__________ 進行酶切。
(4)假設大腸桿菌突變菌株甲中EPSPS基因的右側序列如圖2所示,請在方框內(nèi)畫出經(jīng)酶切后產(chǎn)生的兩個末端的堿基序列。(2分)
(5)假設EPSPS基因已被成功轉移到植物F中,但植物F仍沒有表現(xiàn)出抗性,分析可能的原因_____________。
下圖甲是某目的基因(4.0kb,1kb=1000對堿基)與大腸桿菌pUC18質粒(2.7kb)重組的示意圖。圖中Ap′是抗氨芐青霉素基因,lacZ是顯色基因,其上的EcoRI識別位點位于目的基因插入位點的右側,其控制合成的物質能使菌落呈現(xiàn)藍色。(圖乙中深色圓點即為藍色菌落)
(6)圖乙的培養(yǎng)基中含有氨芐青霉素,請判斷圖乙中所出現(xiàn)的白色和藍色兩種菌落中,何種會含有重組質粒。___________。
(7)現(xiàn)用EcoRI酶切質粒,酶切后進行電泳觀察,若出現(xiàn)長度為_________kb和 kb的片段,則可以判斷該質粒已與目的基因重組成功。(重組質粒上目的基因的插入位點與EcoRI的識別位點之間的堿基對忽略不計)
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科目:高中生物 來源:2012-2013學年江蘇省高三最后一次模擬考試生物試卷(解析版) 題型:綜合題
回答下列關于基因工程的問題。
草甘膦是一種廣譜除草劑,其除草機制是抑制植物體內(nèi)EPSPS酶的合成,最終導致植物死亡。但是,它的使用有時也會影響到植物的正常生長。目前,已發(fā)現(xiàn)可以從一種抗草甘膦的大腸桿菌突變株中分離出EPSPS基因,若將該基因轉入植物細胞內(nèi),從而獲得的轉基因植物就能耐受高濃度的草甘膦。
下圖A-F表示6株植物,其中,植物A和D對草甘膦敏感,B和E對草甘膦天然具有抗性,C和F則經(jīng)過了轉基因處理,但是是否成功還未知。圖1和2分別表示兩段DNA序列。表格中1-4分別表示4種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點。據(jù)圖回答下列問題:
.
(1)若A-C澆清水,D-F澆的水中含有草甘膦,上述植物中,肯定能健康成長的是_________。
(2)若要從大腸桿菌中篩選出含EPSPS基因的突變菌株甲,在大腸桿菌培養(yǎng)基中還必須加入 ___________。
(3)假設位于EPSPS基因兩側的DNA序列均如圖I所示,則應選擇表中酶__________進行酶切;若位于EPSPS基因兩側的DNA序列分別如圖I和II所示,則應選擇表中酶__________ 進行酶切。
(4)假設大腸桿菌突變菌株甲中EPSPS基因的右側序列如圖II所示,請在方框內(nèi)畫出經(jīng)酶切后產(chǎn)生的兩個末端的堿基序列。(2分)
(5)假設EPSPS基因已被成功轉移到植物F中,但植物F仍沒有表現(xiàn)出抗性,分析可能的原因_______________________________________________________________。
下圖甲是某目的基因(4.0kb,1kb=1000對堿基)與大腸桿菌pUC18質粒(2.7kb)重組的示意圖。圖中Ap′是抗氨芐青霉素基因,lacZ是顯色基因,其上的EcoRI識別位點位于目的基因插入位點的右側,其控制合成的物質能使菌落呈現(xiàn)藍色。(圖乙中深色圓點即為藍色菌落)
(6)圖乙的培養(yǎng)基中含有氨芐青霉素,請判斷圖乙中所出現(xiàn)的白色和藍色兩種菌落中,何種會含有重組質粒。___________。
(7)現(xiàn)用EcoRI酶切質粒,酶切后進行電泳觀察,若出現(xiàn)長度為_________kb和 kb的片段,則可以判斷該質粒已與目的基因重組成功。(重組質粒上目的基因的插入位點與EcoRI的識別位點之間的堿基對忽略不計)
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科目:高中生物 來源:2013屆黑龍江龍東高二下學期高中教學聯(lián)合體期末生物試卷(解析版) 題型:綜合題
下表中列出幾種限制酶識別序列及其切割位點,圖1、圖2中箭頭表示相關限制酶的酶切位點。請回答下列問題。
(1)一個圖1所示的質粒分子經(jīng)SmaⅠ切割前后,分別含有 個游離的磷酸基團。
(2)若對圖中質粒進行改造,插入SmaⅠ酶切位點越多,質粒的熱穩(wěn)定性越 。用圖中的質粒和外源DNA構建重組質粒,不能使用SmaⅠ,原因是 。
(3)與使用EcoRⅠ相比較,使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時處理質粒、外源DNA的優(yōu)點在于可以防止 。
(4)為了獲取重組質粒,將切割后的質粒與目的基因片段混合,并加入 酶。重組質粒中抗生素抗性基因的作用是為了 。
(5)為了從cDNA文庫中分離獲取蔗糖轉運蛋白基因,將重組質粒導入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體,然后在 的培養(yǎng)基中培養(yǎng),以完成目的基因表達的初步檢測。
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科目:高中生物 來源:江蘇省南通市2010屆高三第一次模擬考試(生物) 題型:綜合題
(7分)女婁菜為雌雄異株的植物,下列圖1為女婁菜的性染色體組成。已知女婁菜的葉型有寬葉和窄葉兩種類型,由一對基因(B和b)控制。由于基因突變,導致其某種基因型的花粉粒死亡,F(xiàn)有下列雜交實驗,結果如圖2表中所示。請回答:
(1)圖1中②號染色體為 染色體,②號染色體上除Ⅳ區(qū)外的基因的遺傳特點是 。
(2)控制女婁菜葉型的基因在 染色體上,寬葉基因是 性基因。
(3)第1組和第2組雜交實驗的子代都沒有雌性植株,推測其可能原因是
。
(4)第2組雜交實驗中親本中的雌株和雄株的基因型分別為 。
(5)若讓第3組子代的寬葉雌株與寬葉雄株雜交,預測其后代中寬葉與窄葉的比例為 。
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科目:高中生物 來源: 題型:單選題
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