Question

【題目】回答下列（一）、（二）小題

（一）研究小組從土壤中篩選以多環(huán)芳烴（PAHs）為碳源和能源的細(xì)菌，用以降解工業(yè)廢水和生活污水中的PAHs。請(qǐng)回答：

（1）為了從土壤中篩選PAHs降解菌，需配制以____________為唯一碳源的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基經(jīng)________[A. 121℃（500g/cm2 壓力），15min B. 90℃（500g/cm2壓力），15min C. 121℃（lkg/cm2壓力），15minD. 90℃（500g/cm2壓力），30min]髙壓蒸汽滅菌，待冷卻至60℃后倒平板。

（2）倒平板時(shí)應(yīng)使錐形瓶的瓶口通過火焰，目的是____________。在倒平板的過程中，如果培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，則這個(gè)平板不能用來培養(yǎng)PAHs降解菌，原因是________________________。

（3）制備土壤稀釋液，用____________方法接種于固體培養(yǎng)基表面，培養(yǎng)時(shí)，需將培養(yǎng)皿____________并放在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。

（4）用劃線法純化PAHs降解菌的過程中，在第二次及其后的劃線操作時(shí)，須從上一次劃線的末端開始劃線，原因是____________________________________。

（二）下圖為某大學(xué)農(nóng)學(xué)部奶牛繁育基地成功培育出的一頭攜帶轉(zhuǎn)入賴氨酸基因的克隆牛的大致過程，請(qǐng)據(jù)圖回答問題：

（1）圖中獲得賴氨酸基因常用的酶是____________________，若我們己知賴氨酸基因的堿基序列，一般釆用____________法獲取該目的基因。

（2）黑白花奶牛乳腺組織常用____________分散成單細(xì)胞，然后作為核供體。將得到的體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的未受精的卵細(xì)胞中才能發(fā)育成新個(gè)體，其原因是____________（A.卵細(xì)胞大，便于操作B.卵細(xì)胞含有的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)多 C.卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞核全能性得到表達(dá) D.重組細(xì)胞才具有全能性）。

（3）從④到⑤的過程可獲得較多的遺傳同質(zhì)早期胚胎，常采用的方法是進(jìn)行____________。

（4）克隆牛的誕生過程中涉及到的現(xiàn)代生物技術(shù)主要有：____________、____________。

Answer 1

【答案】 PAHs C 防止雜菌污染 空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生 涂布 倒置 使細(xì)菌數(shù)隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的菌落 限制性核酸內(nèi)切酶 化學(xué)合成 胰蛋白酶 C 胚胎分割 核移植技術(shù) 胚胎分割

【解析】試題分析：熟記并理解微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)等相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)，形成清晰的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)；在此基礎(chǔ)上，從題意中提取信息并對(duì)（一）題進(jìn)行作答。以圖示中的文字信息和箭頭指向?yàn)榍腥朦c(diǎn)，圍繞目的基因的獲取、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、核移植技術(shù)、胚胎分割技術(shù)等相關(guān)知識(shí)，結(jié)合問題情境，對(duì)（二）題進(jìn)行解答。

（一）(1) 從土壤中篩選PAHs降解菌，需配制以PAHs為唯一碳源的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基經(jīng)C選項(xiàng)所示的121℃（lkg/cm2壓力）、15min的髙壓蒸汽滅菌，待冷卻至60℃后倒平板。

(2) 倒平板時(shí)，為了防止雜菌污染，應(yīng)使錐形瓶的瓶口通過火焰。在倒平板的過程中，如果培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，則可能導(dǎo)致空氣中的微生物在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此這個(gè)平板不能用來培養(yǎng)PAHs降解菌。

(3) 制備土壤稀釋液，用涂布方法接種于固體培養(yǎng)基表面。培養(yǎng)時(shí)，為了防止培養(yǎng)皿被污染，需將培養(yǎng)皿倒置并放在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。

(4) 用劃線法純化PAHs降解菌的過程中，在第二次及其后的劃線操作時(shí)，須從上一次劃線的末端開始劃線，原因是：使細(xì)菌數(shù)隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的菌落。

（二）(1)圖中的賴氨酸基因?yàn)槟康幕�因，獲得目的基因常用限制性核酸內(nèi)切酶。若我們己知賴氨酸基因的堿基序列，一般釆用化學(xué)合成法獲取該目的基因。

(2)常用胰蛋白酶處理黑白花奶牛乳腺組織，使其分散成單細(xì)胞，然后作為核供體。由于C選項(xiàng)所示的卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞核全能性得到表達(dá)，所以需將得到的體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的未受精的卵細(xì)胞中才能發(fā)育成新個(gè)體。

(3)從④到⑤的過程，常采用胚胎分割技術(shù)，以獲得較多的遺傳同質(zhì)早期胚胎。

(4)分析圖示可知，克隆牛的誕生過程中涉及到的現(xiàn)代生物技術(shù)主要有：核移植技術(shù)、胚胎分割技術(shù)。