Question

【題目】某科研小組從某溫泉口取得一批土樣，希望從中分離出耐高溫的可分解木質(zhì)素的細(xì)菌。

（1）采集土樣后，為增加所需細(xì)菌的濃度，采用的培養(yǎng)方法是________________。

（2）為篩選分解木質(zhì)素的細(xì)菌，培養(yǎng)基中加入的唯一碳源是__________，培養(yǎng)基中還必須包含水、無(wú)機(jī)鹽和______________等基本營(yíng)養(yǎng)成分。從功能上講，這樣的培養(yǎng)基稱(chēng)為__________培養(yǎng)基。為避免培養(yǎng)基污染，需將培養(yǎng)皿呈_____________狀態(tài)放置。

（3）培養(yǎng)過(guò)程中，常選擇菌落數(shù)在__________區(qū)間的平板統(tǒng)計(jì)計(jì)數(shù)。統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的真實(shí)數(shù)目低，原因是____________________。

（4）研究小組利用基因工程技術(shù)成功表達(dá)并分離出木質(zhì)素分解酶，為探究該酶的最適pH，應(yīng)控制的無(wú)關(guān)變量有____________________________（寫(xiě)出兩項(xiàng)即可）。

若需較長(zhǎng)時(shí)間保持酶活性，酶制劑都應(yīng)保存在____________________（填“低溫”、“最適溫度”或“高溫”）環(huán)境中。

Answer 1

【答案】震蕩培養(yǎng)（液體培養(yǎng)） 木質(zhì)素 氮源 選擇 倒置 30~300 兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的是一個(gè)菌落 酶的用量、反應(yīng)溫度、底物的含量等 低溫

【解析】

1、微生物常見(jiàn)的接種的方法：

①平板劃線(xiàn)法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線(xiàn)，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線(xiàn)的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線(xiàn)的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落，可用于微生物的計(jì)數(shù)。

2、培養(yǎng)基選擇分解木質(zhì)素的微生物的原理：培養(yǎng)基的碳源為木質(zhì)素，只有能分解木質(zhì)素的微生物才能在這個(gè)培養(yǎng)基上生存，不能分解木質(zhì)素的微生物由于缺乏碳源而不能生長(zhǎng)發(fā)育繁殖從而受到抑制，所以用此培養(yǎng)基就能夠選擇出分解木質(zhì)素的微生物。

3、培養(yǎng)基按功能分：

種類(lèi)	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分	根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選率	如加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學(xué)藥品	依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)	如可用伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

（1）采集土樣后，為增加所需細(xì)菌的濃度，采用的培養(yǎng)方法是震蕩培養(yǎng)（液體培養(yǎng)）。

（2）為篩選分解木質(zhì)素的細(xì)菌，培養(yǎng)基中加入的唯一碳源是木質(zhì)素；培養(yǎng)基中還必須包含水、無(wú)機(jī)鹽和氮源等基本營(yíng)養(yǎng)成分；從功能上講，這樣的培養(yǎng)基稱(chēng)為選擇培養(yǎng)基；為避免培養(yǎng)基污染，需將培養(yǎng)皿呈倒置狀態(tài)放置。

（3）通常選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)，以保證獲得菌落數(shù)在30~300之間、適于計(jì)數(shù)的平板；統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的真實(shí)數(shù)目低，原因是兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的是一個(gè)菌落。

（4）影響酶的因素有反應(yīng)溫度、酶的用量、pH、底物含量等，為探究該酶的最適pH，應(yīng)控制的無(wú)關(guān)變量有反應(yīng)溫度、酶的用量、底物含量等；低溫抑制酶的活性，若需較長(zhǎng)時(shí)間保持酶活性，酶制劑都應(yīng)保存在低溫環(huán)境中。