Question

回答有關(guān)生物工程的問題：
（1）構(gòu)建基因工程表達(dá)載體時，用不同類型的限制酶切割DNA后，可能產(chǎn)生

 

，也可能產(chǎn)生平末端．若要用限制酶切割

 

和質(zhì)粒后使其直接進(jìn)行連接，則應(yīng)選擇相同的限制酶．
（2）利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素時，構(gòu)建的表達(dá)載體含有人胰島素基因及其啟動子等，其中啟動子也是一段

 

分子．在用表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時，常用CaCl2處理大腸桿菌，以利于表達(dá)載體進(jìn)入，這種細(xì)胞稱為

 

；為了檢測胰島素基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，可用標(biāo)記的

 

片段作探針與mRNA雜交，該雜交技術(shù)稱為分子雜交技術(shù)．為了檢測胰島素基因轉(zhuǎn)錄的mRNA是否翻譯成胰島素，常用

 

．
（3）如果將目的基因?qū)�入動物體內(nèi)，首先要進(jìn)行

 

的采集和培養(yǎng)，讓其與

 

的精子在體外受精．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的應(yīng)用

專題：

分析：限制酶主要從原核生物中分離純化出來，能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．形成黏性末端和平末端兩種．
將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法因細(xì)胞種類不同而不同，將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞時，常用CaCl₂處理微生物，使其成為易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)細(xì)胞．
分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．

解答： 解：（1）用不同類型的限制酶切割DNA后，可能產(chǎn)生兩種類型的末端，即黏性末端或平末端．若要用限制酶切割目的基因和質(zhì)粒后使其直接進(jìn)行連接，則應(yīng)選擇相同的限制酶，以切割產(chǎn)生相同的黏性末端．
（2）構(gòu)建的表達(dá)載體含有目的基因（人胰島素基因）、標(biāo)記基因、啟動子及終止子等，其中啟動子、終止了也是一段DNA分子．將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞時，若受體細(xì)胞是微生物細(xì)胞（如大腸桿菌），常用CaCl₂處理微生物，使其成為易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)細(xì)胞，這樣有利于表達(dá)載體進(jìn)入受體細(xì)胞；為了檢測胰島素基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，可用采用分子雜交技術(shù)，即用標(biāo)記的胰島素基因片段作探針與mRNA雜交．為了檢測胰島素基因轉(zhuǎn)錄的mRNA是否翻譯成胰島素，常用抗原-抗體雜交技術(shù)．
（3）體外受精包括：精子獲能、卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)和體外受精．
故答案：（1）黏性末端    目的基因
（2）DNA     感受態(tài)細(xì)胞  胰島素基因  抗原-抗體雜交技術(shù)
（3）卵母細(xì)胞      獲能

點(diǎn)評：本題考查基因工程、胚胎工程的相關(guān)知識，意在考查考生的識記能力和理解所學(xué)知識要點(diǎn)，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識，對生物學(xué)問題作出準(zhǔn)確的判斷．