Question

【題目】干擾素是一種重要的免疫活性物質(zhì)，具有抗病毒、調(diào)節(jié)免疫等功效。研究人員利用基因工程通過培育山羊乳腺生物反應(yīng)器大量生產(chǎn)干擾素。請回答下列問題：

（1）基因工程獲取的人干擾素基因一般來自cDNA文庫，cDNA中______________（填“有”或沒有”）啟動子。獲取的目的基因可通過______________大量擴增，擴增需要的條件有_______________。（至少答出3項）

（2）重組人干擾素基因表達載體由山羊酪蛋白基因啟動子，人干擾素基因，標(biāo)記基因和終止等組成，其中______________決定了人干擾素基因只能在山羊乳腺細胞中特異性表達，將該重組表達載體導(dǎo)入受體細胞一般采用____________________________。

（3）一般需要將重組人干擾素基因表達載體導(dǎo)入______________（填“雄性”或“雌性”）胚胎細胞中。在轉(zhuǎn)基因羊發(fā)育成熟時，為了檢測羊奶中是否有人干擾素，可用______________方法。

（4）如果我們采用蛋白質(zhì)工程來合成人干擾素，可以通過______________，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進改造，或制造新的蛋白質(zhì)，以滿足人類生產(chǎn)和生活的需要。

Answer 1

【答案】沒有 PCR技術(shù) 模板DNA、原料、引物、耐熱的DNA聚合酶、高溫等 山羊酪蛋白基因啟動子 顯微注射 雌性 抗原—抗體雜交 基因修飾或基因合成

【解析】

基因工程操作的四個基本步驟是：獲取目的基因，基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細胞和目的基因的檢測與鑒定。培育轉(zhuǎn)基因動物時，一般用受精卵和胚胎干細胞作為受體細胞，因為這些細胞的全能性最大，易培養(yǎng)出一個新個體。當(dāng)動物細胞作受體細胞時，一般采用顯微注射法將目的基因?qū)�入�?/span>

（1）cDNA文庫是生物某個時期的mRNA逆轉(zhuǎn)錄而來的，故與基因組文庫相比，cDNA中沒有啟動子；獲得的目的基因可通過PCR技術(shù)大量擴增，進行擴增的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物，此外還需模板DNA、原料、耐熱的DNA聚合酶等條件。

（2）啟動子能夠啟動基因的轉(zhuǎn)錄，重組人干擾素基因表達載體中的山羊酪蛋白基因啟動子決定了人干擾素基因只能在山羊乳腺細胞中特異性表達；培育轉(zhuǎn)基因動物時，常以受精卵為受體細胞，且將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法。

（3）雌羊能夠泌乳，故一般需要將重組人干擾素基因表達載體導(dǎo)入雌性胚胎細胞中；在轉(zhuǎn)基因羊發(fā)育成熟時，為了檢測羊奶中是否有人干擾素，可用抗原-抗體雜交的方法。

（4）蛋白質(zhì)工程指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要，故對現(xiàn)有蛋白的改造應(yīng)通過基因修飾或基因合成實現(xiàn)。