Question

【題目】GRFT是一種來源于紅藻的外源凝集素，能作為治療艾滋病的候選藥物。某實驗小組將GRFT基因導入煙草細胞的染色體基因組中，發(fā)現(xiàn)煙草中GRFT基因的表達量可達60%~90%。請回答下列問題：

（1）將GRFT基因導入煙草細胞的染色體基因組的方法為__________，該方法能將GRFT基因導人煙草細胞的染色體基因組，利用的是T—DNA具有_________的特點。

（2）構建重組質粒時可插入NPTII基因，具有該基因的轉基因植物的葉綠體離體培養(yǎng)時會出現(xiàn)退綠現(xiàn)象，據(jù)此可知重組質粒中的NPTII基因實質上是一種_________，其作用是_________。基因工程中的運載體除了質粒外，還有___________。

（3）欲大量獲得GRFT，可利用植物組織培養(yǎng)技術將轉基因煙草細胞培育到______階段，原因是該階段的細胞具有______________________的特點。

Answer 1

【答案】農(nóng)桿菌轉化法 可轉移至受體細胞并且整合到受體細胞染色體的DNA上 標記基因 鑒別受體細胞中是否有目的基因，從而將含自的基因的細胞篩選出來 動植物病毒以及λ噬菌體的衍生物 愈傷組織 分裂、代謝旺盛

【解析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）將GRFT基因導入煙草細胞的染色體基因組的方法為農(nóng)桿菌轉化法，該方法能將GRFT基因導入煙草細胞的染色體基因組，農(nóng)桿菌中Ti質粒上的T-DNA具有可轉移至受體細胞并且整合到受體細胞染色體的DNA上的特點。

（2）構建重組質粒時可插入NPTII基因，具有該基因的轉基因植物的葉綠體離體培養(yǎng)時會出現(xiàn)退綠現(xiàn)象，據(jù)此可知重組質粒中的NPTII基因實質上是一種標記基因，其作用是鑒別受體細胞中是否有目的基因，從而將含自的基因的細胞篩選出來�；�因工程中的運載體除了質粒外，還有動植物病毒以及λ噬菌體的衍生物。

（3）欲大量獲得GRFT，可利用植物組織培養(yǎng)技術將轉基因煙草細胞培育到愈傷組織階段;原因是該階段的細胞分裂、代謝旺盛，可從培養(yǎng)液中大量獲得GRFT。