Question

5．某研究小組進(jìn)行藥物試驗(yàn)時(shí)，以動(dòng)物細(xì)胞為材料，測(cè)定藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性．供培養(yǎng)的細(xì)胞有甲、乙兩種，甲為骨髓瘤細(xì)胞，乙為經(jīng)免疫過(guò)的正常漿細(xì)胞．請(qǐng)答題：
（1）將數(shù)量相等的甲和乙分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)液及其它培養(yǎng)條件均相同且適宜．一段時(shí)間后，觀察到的現(xiàn)象是甲增多，乙不增多．
（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿(mǎn)足一定的條件，下列有關(guān)表述正確的有①②（選擇填寫(xiě)下列條件前的序號(hào)）．
①對(duì)培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理，在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液，這些做法都有利于提供一個(gè)無(wú)菌無(wú)毒的培養(yǎng)環(huán)境
②在使用合成培養(yǎng)基時(shí)，通常需加入血漿等天然成分
③所有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜溫度均為36.5±0.5℃，多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞生存的適宜pH為7.0左右
④動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需的氣體只是O₂，因?yàn)镺₂是細(xì)胞代謝所必需
⑤培養(yǎng)液中需添加一定濃度和比例的生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素，以誘導(dǎo)細(xì)胞脫分化和再分化
（3）藥物試驗(yàn)需要大量細(xì)胞，甲乙看來(lái)都不適合用于試藥，理由是：甲有部分基因已經(jīng)發(fā)生了變異，藥物對(duì)甲的效果不一定與正常體細(xì)胞的效果相同，乙在體外培養(yǎng)不能增殖，不能得到大量細(xì)胞用于試藥．．
（4）令甲乙細(xì)胞融合，所獲雜交細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下，具有既能增殖，又能產(chǎn)生專(zhuān)一抗體的特點(diǎn)．
（5）已知癌細(xì)胞中X基因過(guò)量表達(dá)與骨髓瘤的發(fā)生密切相關(guān)．要試驗(yàn)一種抗腫瘤藥物Y對(duì)甲生長(zhǎng)的影響，可將甲分為A、B兩組，A組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入Y，B組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入無(wú)菌生理鹽水，在相同且適宜條件下培養(yǎng)一定時(shí)間后，從A、B兩組收集等量細(xì)胞，通過(guò)分別檢測(cè)X基因在A、B兩組細(xì)胞中的合成mRNA和蛋白質(zhì)水平的差異，以確定Y的藥效．

Answer 1

分析 1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿(mǎn)瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)．
2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：
（1）無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物．
（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)．
（3）溫度和PH．
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO₂（維持培養(yǎng)液的PH）．

解答 解：（1）已知甲細(xì)胞為骨髓瘤細(xì)胞，乙正常細(xì)胞為漿細(xì)胞．將數(shù)量相等的甲和乙分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)液及其它培養(yǎng)條件均相同且適宜．一段時(shí)間后，觀察到的現(xiàn)象是甲增多，乙不增多．
（2）解：①對(duì)培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理，在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液，這些做法都有利于提供一個(gè)無(wú)菌無(wú)毒的培養(yǎng)環(huán)境，①正確；
②在使用合成培養(yǎng)基時(shí)，通常需加入血漿等天然成分，②正確；
③細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度和動(dòng)物體溫相近，哺乳動(dòng)物動(dòng)物多以36.5±0.5℃為宜，多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞生存的適宜pH為7.2-7.4，③錯(cuò)誤；
④動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需的氣體主要有氧氣和二氧化碳，O₂是細(xì)胞代謝所必需，二氧化碳主要維持培養(yǎng)液的PH．④錯(cuò)誤；
⑤動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，不需要添加植物激素，⑤錯(cuò)誤．
故選：①②．
（3）藥物試驗(yàn)需要大量細(xì)胞，甲乙看來(lái)都不適合用于試藥，因?yàn)榧子胁糠只�因已�?jīng)發(fā)生了變異，藥物對(duì)甲的效果不一定與正常體細(xì)胞的效果相同，乙在體外培養(yǎng)不能增殖，不能得到大量細(xì)胞用于試藥．
（4）甲乙細(xì)胞融合，所獲雜交細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下，具有既能增殖，又能產(chǎn)生專(zhuān)一抗體的特點(diǎn)．
（5）該實(shí)驗(yàn)的目的是試驗(yàn)一種抗腫瘤藥物Y對(duì)甲細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，因此自變量為是否加入Y，B組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入等量無(wú)菌生理鹽水，則A組細(xì)胞培養(yǎng)液中應(yīng)加入等量Y．已知基因X表達(dá)與肝腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，而基因X的表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)步驟，抗癌藥物Y的作用可能是抑制基因X的轉(zhuǎn)錄過(guò)程，也可能是抑制其翻譯過(guò)程，因此通過(guò)分別檢測(cè)基因X在A、B兩組細(xì)胞中的mRNA或相關(guān)蛋白質(zhì)合成水平的差異，可以確定Y的藥效．
故答案為：
（1）甲增多，乙不增多
（2）①②
（3）甲有部分基因已經(jīng)發(fā)生了變異，藥物對(duì)甲的效果不一定與正常體細(xì)胞的效果相同，乙在體外培養(yǎng)不能增殖，不能得到大量細(xì)胞用于試藥
（4）既能增殖，又能產(chǎn)生專(zhuān)一抗體的特點(diǎn)
（5）Y  mRNA和蛋白質(zhì)

點(diǎn)評(píng) 題以藥物試驗(yàn)為背景，考查癌細(xì)胞的主要特征、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、探究實(shí)驗(yàn)，要求考生識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程及動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件；識(shí)記癌細(xì)胞的主要特征；明確實(shí)驗(yàn)的目的，理解實(shí)驗(yàn)的原則，能結(jié)合轉(zhuǎn)錄和翻譯的過(guò)程答題．