Question

4．反轉(zhuǎn)錄病毒載體是一種表達型質(zhì)粒，結(jié)構(gòu)如圖所示．圖上的“反轉(zhuǎn)錄病毒序列”可以整合到動物細胞的染色體上，不斷地表達其攜帶的目的基因．（E、F、H分別為限制酶E、F、H的酶切位點）．
（1）反轉(zhuǎn)錄的原料是（四種）脫氧核苷酸．
（2）在構(gòu)建重組質(zhì)粒時，目的基因應(yīng)插入到該質(zhì)粒的位置是F（或：反轉(zhuǎn)錄病毒序列），此過程需使用的酶是限制酶和DNA連接酶．為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要用添加抗生素A的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)．獲取大量重組質(zhì)粒后，將其再轉(zhuǎn)入到某種哺乳動物細胞中，可獲得大量重組反轉(zhuǎn)錄病毒．

Answer 1

分析 據(jù)圖分析，基因表達載體的構(gòu)建是實施基因工程的第二步，也是基因工程的核心，基因工程載體的條件是能在受體細胞中保存并大量復(fù)制、有一至多了限制性內(nèi)切酶切點和有特殊的遺傳標(biāo)記基因，便于進行篩選．反轉(zhuǎn)錄酶序列中有限制酶F的切割位點，目的基因與運載體結(jié)合，在粘性末端堿基互補配對，需要DNA連接酶作用于磷酸二酯鍵，形成重組DNA分子；該質(zhì)粒上有具有的遺傳標(biāo)記基因是抗生素A抗性基因，可以用加有抗生素A的選擇培養(yǎng)基進行篩選．

解答 解：（1）逆轉(zhuǎn)錄是以RNA為模板合成DNA的過程，所需要的模板為RNA，原料為四種脫氧核苷酸．
（2）基因工程需要工具酶是限制酶和DNA連接酶；用到的限制酶不能破壞標(biāo)記基因（抗生素A抗性基因），且應(yīng)該整合到“逆轉(zhuǎn)錄病毒序列”上；抗生素A抗性基因為標(biāo)記基因，用來幫助篩選目的基因．
故答案為：
（1）（四種）脫氧核苷酸       
（2）F（或反轉(zhuǎn)錄病毒序列）　   限制酶和DNA連接酶　    抗生素A

點評 本題考查RNA復(fù)制，逆轉(zhuǎn)錄需要的模板、原料，重組質(zhì)粒時目的基因的插入位點的知識，意在考查學(xué)生識圖能力、信息的提取與應(yīng)用能力、通過比較與綜合做出合理判斷的能力等．